摘要
本发明涉及一种高表达DNase I的重组毕赤酵母菌及其构建方法与应用。本发明DNase I的表达系统，包括宿主细胞和转化入宿主细胞的表达载体，所述表达载体包括插入有DNase I的第一表达载体和插入有分子伴侣的第二表达载体，所述宿主细胞为毕赤酵母GS115。本发明的有益效果主要体现在：(1)DNase I酶可以降解宿主的DNA，因此对表达宿主有一定的毒性。毕赤酵母可以采用分泌表达的形式将合成的DNase I蛋白运输到胞外，减少DNase I对宿主的毒性，从而提高DNase I的体积表达量。(2)毕赤酵母本身分泌的蛋白比较少，因此如果目的蛋白能有效表达，下游纯化过程将会较为简单。(3)采用PCI共表达的方法，显著提高了DNase I的产率，由于PCI采用胞内表达的形式，不会被分泌到胞内，因此不会影响培养基中DNase I蛋白的纯化步骤。
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