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本发明涉及一种高效丝素重链分泌型重组表达系统的建立与应用，利用一类增强子hr3、非翻译区序列3’UTR等增强基因表达的功能元件，对家蚕丝素重链启动子(Fib‑H promoter)的效率进行优化，在此基础上整合建立高效、稳定的分泌型丝素重链(Fib‑H)重组表达系统，实现在转基因家蚕后部丝腺高效分泌重组表达外源蛋白。本发明建立了一种高效的丝素重链分泌表达系统，实现了外源蛋白在蚕丝中以其天然大小的分子量大量分泌且具备活性，与之前的丝素表达系统相比在应用上更有前景。

本发明涉及一种简便快速定量重组杆状病毒的方法，具体而言，该方法是通过检测共表达的荧光素酶活性来定量测定重组昆虫杆状病毒滴度的方法。本发明公开了一种分泌性荧光素酶表达盒：hr5增强子‑IE1启动子‑L21‑secrNluc‑IE1终止子，其核酸序列如SEQ ID NO：1所述。本发明还同时公开了一种基于共表达分泌性荧光素酶快速滴定重组杆状病毒的方法。采用本发明的方法数分钟内就能完成测定酶活。

本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及人源Tsg101‑Vps28‑Vps37‑Mvb12A四元复合物的制备方法及应用。通过分别针对人源Tsg101、Vps28、Vps37和Mvb12A设计截短体；获取组成人源ESCRT‑I复合物的四种亚基的截短体编码序列片段；分别克隆至昆虫表达载体并转化DH10Bac感受态细胞获得重组Bacmid杆粒；将四种重组杆粒分别转染sf9昆虫细胞产生重组杆状病毒并扩增至P2代病毒储液，将四种P2代病毒等比例感染sf9细胞进行目的蛋白表达；经层析纯化获得人源ESCRT‑I四元复合物。该复合物为解析ESCRT‑I复合物结构及阐释ESCRT‑I复合物介导膜出芽机制奠定基础。

本发明公开了一种延长家蚕感染核型多角体病毒死亡时间的方法及其重组杆状病毒和应用，该方法敲除家蚕核型多角体病毒的gp64基因，在此基础上回复截短了18个氨基酸的gp64基因，构建的重组病毒半数致死时间较对照延长了32小时，达到显著差异，但是重组病毒的一步生长曲线和对照没有显著差异。本发明制备用于延长家蚕感染核型多角体病毒死亡时间的重组杆状病毒，可以有效延迟感染家蚕幼虫的死亡时间，不影响病毒的增值。本发明的重组杆状病毒为利用家蚕杆状病毒表达系统在虫体内制备外源蛋白提供了更长时间。本发明提供的方法简单明了，易于理解、操作简单易行，效率高。