本发明属于生物技术领域,公开了一种增强细菌中外源蛋白活性和表达的前导稳定元件。为沙门氏菌肠亚种肠衣原体鼠伤寒菌株RM13672SspH1蛋白N端的208个氨基酸残基片段,其核苷酸序列如SEQ.ID.NO:1所示,氨基酸序列如SEQ.ID.NO:2所示。本发明得到的增强细菌中外源蛋白活性和表达的前导稳定元件,可以在工业界或科研中把它用作一个提升蛋白产量和蛋白活力的工具,有助于科学研究和生物医药工业生产以及抗传染病疫苗制备。此外,谷胱甘肽S转移酶(GST)是一个含有211个氨基酸的蛋白,是最常用的蛋白表达的稳定多肽,但对不同目标蛋白效果差异大。本发明鉴定出的SspH1前导稳定元件可以提供一个新的选择,以获得理想的活性蛋白的表达。
📄 2021107974014
📂 C07K14_255
👤 山西大学
📅 2021-07-14
本发明公开了一种携带人源RhoGDI3基因shRNA腺病毒的构建及其应用,属于生物医药技术领域。所述腺病毒含有抑制人源RhoGDI3基因表达的shRNA,所述shRNA的序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。本发明的腺病毒可以实现体内敲除RhoGDI3基因,达到抑制血管内膜增生的效果,用于制备治疗血管疾病的药物。
📄 202010498909X
📂 C12N15_861
👤 南通大学
📅 2020-06-04
本发明属于基因工程领域,提供了一种可稳定变大的大肠杆菌BL21底盘菌株的构建及工业化应用。利用Crispr/cas9基因编辑工具对大肠杆菌BL21基因组的内源基因hns进行组成型表达的调控,用强启动子及RBS提高内源基因hns的表达量,经基因工程重组后的hns组成型表达菌株命名为B。该菌株相对于未改造的大肠杆菌BL21,第一,形态发生改变,细胞体积增大,包内产能提高;第二,与未改造的大肠杆菌细胞相比具有相同生长速率。该菌株作为工业化的底盘细胞,能够在单位时间内提高目的蛋白的产量。
📄 2018102085267
📂 C12N1_21
👤 北京知产汇科技有限公司
📅 2018-03-14
本发明公开了一株高产微生物油脂红酵母基因工程菌及其构建和培养方法。本发明以一株保藏编号为CCTCC NO:M 2019503、颜色突变的红酵母U13N3为出发菌株,通过设计特定gRNA序列,利用CRISPR/Cas9基因编辑系统,实现三酰甘油脂肪酶AOX2和ATG15功能同时缺失,构建了高产微生物油脂红酵母基因工程菌。本发明的红酵母基因工程菌,以甘油为碳源,发酵120h后胞内油脂含量最高达到0.854g/g干细胞,产油脂能力强,且由于出发菌株颜色突变,所提取油脂的色素含量低,简化了后续处理工艺,适用于工业化大规模生产。
📄 2020116013191
📂 C12N1_19
👤 南京理工大学
📅 2020-12-29
本发明公开了一种番茄基因Solyc09g005730,该基因编码蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还同时公开了上述番茄基因Solyc09g005730的用途:在番茄中敲除突变基因Solyc09g005730,能增加番茄果实的番茄红素含量;本发明还同时提供了番茄中敲除突变基因Solyc09g005730的方法。采用本发明的方法有效提高番茄果实中番茄红素的含量。
📄 2018115801119
📂 C12N15_29
👤 浙江师范大学
📅 2018-12-24
本发明公开了一种群体感应信号分子DSF降解基因fadT,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明从贪铜菌(Cupriavidus pinatubonensis)菌株HN‑2中克隆得到了一种新的负责脂肪酸降解的基因‑DSF降解酶编码基因fadT。该编码基因fadT在野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc)中表达后,能够显著降低Xcc的致病力,对Xcc引起的黑腐病有显著的防治效果。
📄 2021108397404
📂 C12N15_53
👤 华南农业大学
📅 2021-07-23
本发明公开了一种DSF降解酶编码基因fadY及其应用。本发明从不动杆菌(Acinetobacter lactucae)菌株QL‑1中克隆得到了一种新的负责脂肪酸降解的基因‑DSF降解酶编码基因fadY,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。该编码基因fadY在寄主植物中表达后,能够显著提高寄主植物对QS信号分子DSF介导的致病菌的抗病性,能够为QS信号分子DSF的降解提供有效的生物技术手段;因此,所述编码基因fadY、编码蛋白、重组质粒或重组微生物在降解QS信号分子DSF、制备降解QS信号分子DSF的产品、防治QS信号分子DSF介导的致病菌或制备QS信号分子DSF介导的致病菌的防治产品中均具有广泛的应用前景。
📄 2020102588579
📂 C12N15_52
👤 华南农业大学
📅 2020-04-03
本发明公开了一种水解酶基因strB及其编码的蛋白质和应用。所述水解酶基因strB全长为987bp,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其编码产物水解酶StrB含328个氨基酸,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。StrB能催化降解溴氰菊酯、甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、高效氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、醚菌酯、吡唑醚菌酯和嘧菌酯等含有酯键的农药。生产的酶制剂可用于蔬菜、水果、烟草和茶叶等农产品中的农药残留去除,提高农产品品质及增加附加值。水解酶基因strB可进一步用于构建转基因作物彻底解决农业生产中农药残留超标问题,生产无公害绿色农产品;也可用于修复酯类农药污染的土壤、水体等自然环境,具有广阔的应用前景。
📄 2019108699820
📂 C12N15_55
👤 华南农业大学
📅 2019-09-12
本发明公开一种猪繁殖与呼吸综合症病毒重组ORF5基因及其制备方法,重组ORF5基因的核苷酸序列如SEQ ID NO 1所示,本发明利用DNA shuffling技术,对不同遗传分支的PRRSV ORF5基因进行重组,获得重组的ORF5基因,再将重组ORF5基因连接原核表达载体进行原核蛋白表达,重组后的ORF5基因表达蛋白对大部分甚至所有亲本PRRSV均有免疫反应的中和抗体。
📄 2017108629301
📂 C12N15_40
👤 龙岩学院
📅 2017-09-22
本发明公开了一种稳定表达猪圆环病毒2型ORF3蛋白细胞株的构建及应用,属于生物技术检测领域。构建方法包括以下步骤:(1)在pLVZG‑CMV‑copGFP‑Puro载体的NheI和BamHI多克隆位点插入PCV2 ORF3基因;(2)用构建好的pLVZG‑CMV‑ORF3‑copGFP‑Puro重组质粒与病毒包装质粒共转染293T细胞,培养、出毒、收取病毒上清、过滤得重组慢病毒液;(3)将包装好的重组慢病毒感染PK‑15细胞,通过嘌呤霉素筛选及鉴定,得稳定表达PCV2 ORF3蛋白细胞株。本发明利用重组慢病毒系统制备一种融合标签蛋白并能稳定表达PCV2 ORF3蛋白的细胞株,该细胞株为研究PCV2致病机理研究提供平台,有利于猪圆环病毒2型的深层次的致病机制研究。
📄 2021105649193
📂 C12N15_867
👤 龙岩学院
📅 2021-05-24
本发明公开了一种转氨酶突变体以及其编码基因,以及其在微生物催化2‑羰基‑4‑[羟基(甲基)膦酰基]丁酸为底物不对称合成L‑草铵膦中的应用。所述转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID:1所示,其突变体是将SEQ ID:1所示的氨基酸序列的第138和141位中的一个进行单位点突变或组合突变获得的。本发明实现了高转化率转氨酶活力突变体基因的高效表达,酶活最高可达3827U/g。本发明转氨酶突变体在温度40℃,以pH 8.0缓冲液为反应介质进行生物催化反应获得L‑草铵膦,收率高达99%,产物e.e.值达到99%,具有较好应用前景。
📄 2021105603363
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2021-05-21
本发明公开了一种重组细胞及其合成α,β‑不饱和醛的应用,所述重组细胞是将烯醇脱氢酶编码基因、NADPH氧化酶编码基因和血红蛋白编码基因共同导入宿主细胞构建而成。本发明融合共表达烯醇脱氢酶、NADPH氧化酶和血红蛋白的重组细胞一锅法级联催化200mM 2‑丁烯‑1‑醇的选择性氧化,反应6h后底物完全转化为产物2‑丁烯醛,显著地提高了基因工程菌的催化效率;所述方法具有高选择性,反应过程中没有检测到过度氧化产物饱和醛、烯酸和饱和酸,避免了副产物的生成;除了氧气,不需加入其它辅底物,也不需要加入过氧化氢酶;方法绿色高效,可适合大规模工业生产。
📄 2020101189158
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2020-02-26