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本发明涉及一种醛缩酶基因salA及其在构建高产ADD基因工程菌中的应用，以及高产ADD的分枝杆菌基因工程菌及其构建与其在微生物发酵制备1,4‑雄二烯‑3,17‑二酮中的应用。所述高产ADD的分枝杆菌基因工程菌是以分枝杆菌为底盘菌，依次敲除kshA1、MnOpccR、salA基因获得。本发明所提供的基因工程菌株有效地控制了副产物的生成，大大提高甾体底物的利用率和产物的摩尔转化率，简化了后处理的过程，该策略还可以应用在同类型的新金色分枝杆菌进行植物甾醇为底物，微生物转化侧链降解合成AD和9‑OH‑AD等共性合成路径的产物合成，完全阻断4‑HBC，1，4‑HBC副产物合成，在提升底物植物甾醇的利用率的同时抑制副产物累积减少下游分离的负担，具有一定的普适性，适合于大力推广应用，具有较高的经济效益和社会效益。

本发明涉及一种高产4‑HBC的分枝杆菌基因工程菌及其构建方法，以及其在微生物发酵制备22‑羟基‑23,24‑双降胆甾‑4‑烯‑3‑酮中的应用。所述高产4‑HBC的分枝杆菌基因工程菌按如下方法构建：以分枝杆菌为底盘菌，依次敲除kshA1、kshA2、kstD1、kstD2、kstD3基因，敲除hsd4A基因，过表达ltp3、ltp4基因，得到所述高产4‑HBC的分枝杆菌基因工程菌。本发明所提供的基因工程菌株可以生产4‑HBC，大大提高甾体药物的生产效率，有助于提高底物的转化率，降低生产成本，且反应条件温和、环境友好，适合于大力推广应用，具有较高的经济效益和社会效益。

本发明公开了一种酪氨酸酚裂解酶突变体、工程菌及在催化合成左旋多巴中的应用，所述突变体编码基因核苷酸序列为SEQ ID No.5所示；本发明所提供的酪氨酸酚裂解酶突变体与野生型相比，具有更优良的催化性能。TPL突变体合成左旋多巴累积浓度高达146g/L以上，与野生型相比提高了25％～45％，光学纯度大于99.5％；底物邻苯二酚的转化率达到99.8％以上，与野生型相比较提高了15％‑20％。

本发明公开了一种甜橙单萜合酶基因CsCAR1及其应用，具体是柑橘感病后释放出的萜类挥发性物质对柑橘木虱偏好性的影响的应用，通过研究受黄龙病菌调控的萜类挥发物，并明确其对柑橘木虱的偏好性影响，进而为改变柑橘‑木虱的互作，减少或避免柑橘对木虱的吸引，阻断黄龙病的传播提供一定的理论基础。

本发明涉及铃铛子鸟氨酸脱羧酶ALODC基因及其重组表达载体和应用，通过克隆铃铛子鸟氨酸脱羧酶ALODC基因，并通过根癌农杆菌介导的方法将该基因转入铃铛子中，获得转基因植株，过表达AlODC后，能够显著提高铃铛子植株中腐胺及托品烷生物碱的含量，为利用转基因技术高效生产莨菪碱和东莨菪碱提供了一种理想方法。

本发明公开了一种CsACS6基因及在提高柑橘溃疡病抗性中的应用，涉及农业生物技术领域；所述CsACS6基因编码序列如SEQ ID NO.1所示，所述CsACS6基因编码的蛋白为ACC合酶，本发明通过构建CsACS6编码序列的过表达载体，利用根癌农杆菌介导法转化柑橘上胚轴，成功提高了转基因柑橘中CsACS6的表达水平，获得对柑橘溃疡病抗性明显增强的转基因植株；本发明对于柑橘的抗溃疡病育种具有重大应用价值，这将为柑橘溃疡病抗病遗传育种奠定基础，大力促进柑橘抗溃疡病基因工程的发展和应用。

本发明涉及医药领域和生物技术领域，具体涉及治疗苯丙酮尿症的工程益生菌及其构建方法与应用；所述重组表达载体包括重组表达载体一和重组表达载体二；所述重组表达载体一为包含苯丙氨酸氨裂合酶基因PAL核苷酸序列、蛋白质分泌加工结构域编码基因prtP核苷酸序列和嗜酸乳杆菌组成型启动子SL的表达载体；所述重组表达载体二为包含苯丙氨酸氨裂合酶基因PAL核苷酸序列，苯丙氨酸转运泵基因pheP和嗜酸乳杆菌组成型启动子SL的表达载体；首次构建在胃肠道中能够分泌苯丙氨酸氨裂合酶到菌体外的工程益生菌，有效降解胃肠道中被消化食物中的苯丙氨酸，降低患者的苯丙氨酸摄取量，用于治疗PKU。

本发明涉及一种新果胶酶的基因，所述基因为序列表中SEQ ID NO.1的核苷酸序列所示；或者是与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列具有90％以上同源性且编码相同生物学功能蛋白质的序列；或者是能与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列杂交且编码相同生物学功能蛋白质的序列。本发明如序列表中SEQ ID NO.1的核苷酸序列可以利用pET32载体和大肠杆菌表达菌株，实现了表达产物与增溶因子Trx融合，得到大量可溶形式的Trx‑果胶酶融合蛋白，并通过镍亲和层析和DEAE阴离子交换法纯化得到高纯度和高活性的重组果胶酶蛋白，为大量制备重组果胶酶提供基础。

本发明涉及一种果胶酶人工序列及其表达方法和应用，该基因至少含有下列核苷酸序列之一的DNA片：1)序列表中SEQ ID NO.1的核苷酸序列；2)与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列具有90％以上同源性、且编码相同生物学功能蛋白质的核苷酸序列；或3)与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列杂交且编码相同生物学功能蛋白质的核苷酸序列。按照本发明所述的基因序列进一步构建重组载体并转化酵母，可实现该重组果胶酶在甲醇诱导下的分泌表达，通过DEAE阴离子交换纯化，可得到纯度高于95％活性重组果胶蛋白，该活性酶蛋白具有很强的澄清果汁的活性。