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本发明公开了一种印迹脂肪酶及其合成蔗糖‑6‑乙酯的应用，所述印迹脂肪酶按如下方法制备：向脂肪酶酶液中，加入脂肪酸、糖醇，搅拌使其混合均匀，调节混合酶液pH为6.5‑8.5，在20‑30℃恒温下，以120‑160转/分钟的速度搅拌10‑25分钟后，立刻加入大孔树脂，在25‑35℃恒温、60‑100转/分钟下搅拌吸附3‑6h，过滤，获得滤液和滤饼；滤饼用蒸馏水洗涤后，真空干燥，获得印迹脂肪酶；本发明以糖醇辅助，10‑18碳链脂肪酸为印迹分子在水相中印迹脂肪酶，明显提高了印迹酶在有机溶剂中催化酯化的性能，蔗糖酯化率可以提高10％左右，蔗糖酯的六位酯化率可以提高近10％。

本发明公开了一种固定化重组酯酶及其制备R‑2,6‑二甲基苯基氨基丙酸的应用，本发明固定化重组酯酶PAE07具有优异的对映选择性(e.e.p>98％)，高酶活，而且比较稳定，对(R,S)‑N‑(2,6‑二甲基苯基)氨基丙酸甲酯的耐受性好。可以在高底物浓度大于1mol/L的条件下进行催化在线制备R‑2,6‑二甲基苯基氨基丙酸，在最佳条件下具有48.5％的转化率，产物的e.e.p为99％，反应时间为480min，相对于其他催化(R,S)‑N‑(2,6‑二甲基苯基)氨基丙酸甲酯的酶催化效率更高，底物浓度可提高3倍以上，而且可以进行重复循环利用，可大大的节省反应成本，适合工业化生产。

本发明公开了一种共价有机骨架封装酶的制备方法，将聚乙烯聚吡咯烷酮保护的酶溶液先与醛基配体溶液混合，再与氨基配体溶液混合，离心，所得沉淀为价有机骨架封装酶。所述的醛基配体为1,3,5‑三醛基均苯三酚，所述的氨基配体为联苯二胺。本发明方法采用一步合成法制备共价有机骨架封装酶，其操作简单、重复性好、稳定性高。相比传统固定化酶方法，本发明制备的晶态多孔共价有机骨架，能够克服传统酶固定造成的酶活性位点保留不完全的缺点。本发明的共价有机骨架封装酶可以增强游离酶的环境耐受性，提高游离酶的回收率和循环利用率。