本发明公开了一种多基因组合表达制备蛹虫草多糖的方法，所述方法是将组合基因导入蛹虫草细胞构建重组蛹虫草基因工程菌，再将重组蛹虫草基因工程菌接种在发酵培养基中，在22～25℃，100‑150rpm条件下发酵培养，获得含蛹虫草多糖的发酵液，将发酵液分离纯化，获得蛹虫草多糖；所述组合基因是指磷酸葡萄糖变位酶基因pgm，焦磷酸化酶基因ugp或UDP‑葡萄糖‑6‑脱氢酶基因ugdh中任意两种的组合。本发明通过基因组合表达技术构建得到了重组蛹虫草基因工程菌，该基因工程菌株与野生型菌株相比，其发酵液中的虫草胞外多糖产量为1.78倍，并且高于目前文献报道的发酵产生的最大虫草胞外多糖产量5.713g/L。
📄 2020103608423
📂 C12N15_80
👤 浙江工业大学
📅 2020-04-30
本发明提供了ppt1基因在高产赤霉素GA4和GA7中的应用。所述应用的方法为：将ppt1表达框通过构建表达质粒的方式在丝状真菌中表达。通过对丝状真菌中赖氨酸合成途径中的重要基因ppt1基因进行过表达，经优化后的菌株只生产中间代谢产物GA4和GA7，而不生产代谢终产物GA3。该方法操作简单，效果显著，为高产GA4和GA7工程菌株的构建提供了一种新途径。相对于野生型藤仓赤霉菌，本发明提供的藤仓赤霉基因工程菌能更高效的进行GA4和GA7的发酵生产，使得GA4+7混合物产量提高至36倍。
📄 2023113335303
📂 C12N15_80
👤 浙江工业大学
📅 2023-10-16
本发明公开了一种柑橘木虱卵黄蛋白原基因RNAi载体及其制备方法和应用，所述RNAi载体包括骨架载体和发夹结构，所述发夹结构为ihpRNA表达盒，所述ihpRNA表达盒的结构为PtrpC启动子+正向目的基因片段+intron+反向目的基因片段+TtrpC终止子结构，所述目的基因片段为柑橘木虱卵黄蛋白原基因保守序列DcVg1a或DcVg1b；所述骨架载体为丝状真菌表达载体。还公开一种转基因生防真菌及其制备方法和应用，所述转基因生防真菌是采用所述的RNAi载体转化生防真菌得到。得到的转基因渐狭蜡蚧菌经实验证实可有效提高其对柑橘木虱毒力的毒力，缩短对木虱的浸染时间。
📄 2020109217705
📂 C12N15_80
👤 西南大学
📅 2020-09-04
本发明涉及一种提高球孢白僵菌分生孢子产量和毒力的方法，通过破坏球孢白僵菌Pmt1基因编码的MIR结构域，并保留完成的PMT结构域，获得球孢白僵菌突变菌株，所述球孢白僵菌突变菌株具有提高的分生孢子产量和毒力。
📄 2015104662941
📂 C12N15_80
👤 西南大学
📅 2015-08-03
本发明公开了一种光调控启动子降低黑曲霉β‑葡萄糖苷酶表达酶活的方法，属于基因工程领域。本发明方法包括如下步骤：（1）将由光调控启动子或含光调控启动子的DNA序列、表达与β‑葡萄糖苷酶mRNA互补的反义mRNA的DNA序列和终止子序列组成的DNA片段构建到表达载体上；（2）将步骤（1）所构建的重组载体转化到黑曲霉中；（3）转化有重组载体的黑曲霉菌株在光照条件下进行培养。本发明利用光增强表达的启动子调控β‑葡萄糖苷酶mRNA互补的反义mRNA转录，有效降低了β‑葡萄糖苷酶的翻译量和表达的活性，从而优化了黑曲霉表达的纤维素酶系组合，以最大化发挥纤维素酶系降解纤维素的效率。
📄 201611159371X
📂 C12N15_80
👤 中农华威生物制药(湖北)有限公司
📅 2016-12-15
本发明属于生物技术领域，具体涉及应用根癌农杆菌介导的蝉花真菌中的基因敲除遗传转化方法。本发明公开了一种目标基因beas的敲除载体的构建，本发明还同时公开了利用根癌农杆菌介导敲除蝉花虫草菌基因的方法。本发明利用分子生物学方法敲除蝉花虫草真菌中白僵菌素的关键合成基因，使利用该菌株培养24天后收获的菌体中白僵菌素不表达或含量极低。敲除白僵菌素的关键合成基因后的菌株具有不产白僵菌素的遗传稳定性。为针对不产生白僵菌素的蝉花虫草真菌的新药开发提供基础。
📄 2022113838952
📂 C12N15_80
👤 浙江理工大学
📅 2022-11-07
一种提高发酵液中红曲色素色价的方法，是通过红曲霉菌自带的同源重组系统，利用根癌农杆菌介导（ATMT）转化T‑DNA技术完成红曲霉菌中编码C‑24(28)甾醇还原酶的ERG4基因敲除，得到红曲色素高产菌株。本发明能够显著性提高发酵液中红曲色素的生产水平，液态发酵（10d）结果显示，出发菌株胞外色价和总色价分别为14.57 U/mL、106.54 U/mL，本发明构建的重组菌株胞外色价和总色价分别为21.55U/mL、112.78U/mL，胞外色价和总色价分别提高了47.90%、5.86%。
📄 2019102390584
📂 C12N15_80
👤 中南林业科技大学
📅 2019-03-27
本发明公开了一种过表达谷胱甘肽过氧化物酶基因提高虫草素产量的方法。本发明利用根癌农杆菌介导的蛹虫草菌转化技术将过表达谷胱甘肽过氧化物酶基因的重组载体导入蛹虫草中，构建蛹虫草重组菌株，经液体深层发酵虫草素发酵产量显著提高。蛹虫草重组菌株发酵第20d虫草素产量达到了868.53±50.11mg/L，为出发菌株的4.30倍。本发明提出了一种基于氧化应激调控策略改造蛹虫草菌构建高产虫草素的重组菌株的方法，也适用于利用其他微生物高产虫草素工艺的开发，具有工业化应用前景。
📄 2022100215559
📂 C12N15_80
👤 大连工业大学
📅 2022-01-10
柿子坊 · 知识产权运营
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