本发明提供了一种应用于多粘类芽孢杆菌的遗传转化方法,所述方法包括:将多粘类芽孢杆菌接种至液体培养基中培养至生长期中期,制备感受态细胞;将质粒电转化至感受态细胞中,复苏后再进行抗性筛选,获得转化子。利用该方法,本发明成功地将含有Tn10转座子的质粒pIC333电转化至多粘类芽孢杆菌,并验证了该质粒在多粘类芽孢杆菌中同样具有转座效应与温敏特性,便于其在多粘类芽孢杆菌中开展有关转座的遗传操作工作。因此,本发明有效解决了现有技术中外源质粒在多粘类芽孢杆菌转化和转座的问题。
📄 2024106297388
📂 C12N15_75
👤 浙江工业大学
📅 2024-05-21
本发明公开了芽孢杆菌表达载体及其构建方法和应用,该表达载体以pTC、pTN、pBE、pTK为出发载体将不同的启动子PlacI‑IPTG、Psrf、P43、PrepU与终止子T1T2组合分别插入上述载体中,构建四种表达载体。本发明以绿色荧光蛋白和β‑半乳糖苷酶作为报告基因明确该系列表达载体启动异源基因特征,四种表达载体均能在芽孢杆菌宿主中成功表达绿色荧光蛋白和β‑半乳糖苷酶基因,本发明构建的四种表达载体采用强启动子与强的转录终止子进行组合表达,可以在芽孢杆菌中稳定表达的转录出来的RNA,可以进行外源基因的高表达、特异性表达。
📄 2021116808047
📂 C12N15_75
👤 淮阴工学院
📅 2021-12-31