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本发明涉及农业生物基因技术领域，公开了一种利用ClLHCP基因提高柑橘黄脉病抗性的方法，包括以下步骤：（1）克隆柑橘ClLHCP基因的VIGS片段；（2）构建TRV和CLBV两种VIGS表达载体；（3）VIGS表达载体转化柑橘，得到柑橘ClLHCP基因被沉默的VIGS植株。本发明通过构建柑橘ClLHCP基因的VIGS载体，然后转化柑橘，得到的柑橘植株能够对柑橘黄脉病表现明显抗性，柑橘黄化脉明病毒滴度可降低47%，显著减轻了柑橘黄脉病的发病程度，且柑橘ClLHCP基因TRV沉默不会影响柑橘植株的表型，其可以作为候选基因同多个柑橘黄脉病抗病、感病基因利用VIGS沉默、RNA干扰和基因编辑等技术协同进行柑橘黄脉病抗性育种，对于柑橘的抗柑橘黄化脉明病毒育种具有重大应用价值。

本发明属于植物基因工程技术领域，尤其涉及油菜花叶病毒侵染性克隆表达载体及其构建方法。本发明侵染性克隆表达载体pCaYo是由油菜花叶病毒全长序列置于双35S启动子下游制备得到；所述油菜花叶病毒YOMV的基因组全长序列如SEQ ID NO.11所示。本发明首次利用无缝克隆、酵母同源重组等技术构建油菜花叶病毒侵染性克隆载体和携带GFP基因的油菜花叶病毒侵染性克隆载体，将有助于在分子水平上研究病毒与寄主互相作用的机制研究以及能够直观观察病毒侵染寄主的过程。

本发明涉及分子生物学领域，本发明公开了一种基于TRV的CRISPR/Cas12a基因组编辑载体构建方法：利用质粒pTRV2e3构建表达Cas12a蛋白和表达Cas12a蛋白并转录crRNA载体，并通过重组病毒TRVe3在植物中表达Cas12a蛋白和转录crRNA，对靶标基因进行定点编辑。本发明利用病毒TRVe3在表达外源蛋白速度快与含量高的特点对寄主植物的靶标基因进行定点编辑。