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本发明公开了一种栖热腔菌磷酸酶突变体及其应用，所述栖热腔菌磷酸酶突变体由来源于氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的野生型磷酸酶经突变所得，所述突变为以下一种：N212G或N212D。本发明栖热腔菌磷酸酶突变体对氨基葡萄糖‑6‑磷酸具有较高的催化活力(最高达1.64U/mg)，相对于其他磷酸单糖(葡萄糖‑6‑磷酸，葡萄糖‑1‑磷酸，果糖‑6‑磷酸)的酶活力提升不显著或者下降，从而其对氨基葡萄糖‑6‑磷酸的底物专一性较其亲本磷酸酶有了较大的提升。

本发明属于生物催化领域，具体涉及一种突尼斯污水鞘杆菌(Defluviitoga tunisiensis)来源的D‑阿洛酮糖6‑磷酸磷酸酶突变体及应用。所述D‑阿洛酮糖6‑磷酸磷酸酶突变体，以氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的D‑阿洛酮糖6‑磷酸磷酸酶为模板，对其进行定点饱和突变得到；所述D‑阿洛酮糖6‑磷酸磷酸酶突变体的突变位点为下列之一或其中两种以上：(1)第160位的K突变为C；(2)第228位的S突变为A；(3)第48位的C突变为P。本发明提供的D‑阿洛酮糖6‑磷酸磷酸酶突变体在制备D‑阿洛酮糖时产率达到60％，产物中D‑阿洛酮糖与副产物果糖的比例由野生型的1:1提高到6:1。底物专一性调控后的磷酸酶突变体在体外多酶合成系统生产D‑阿洛酮糖中具有重要工业应用潜力。

本发明公开了一种磷酸酶突变体及在催化麦芽糊精制备甘露糖中的应用，所述突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸的第175位、179位或195位进行单点突变获得的。本发明以含磷酸酶突变体编码基因的工程菌发酵培养获得的湿菌体经超声破碎提取的酶液为催化剂，以麦芽糊精为底物，联合葡聚糖磷酸化酶、葡萄糖磷酸变位酶、葡萄糖磷酸异构酶、甘露糖6‑磷酸异构酶，添加MgCl2和磷酸盐，以pH为7.5～8.5的缓冲液为反应介质构成反应体系，制备甘露糖。本发明磷酸酶突变体F179M通过体外一锅法以麦芽糊精为底物生产甘露糖，转化率达到60‑70％，产物甘露糖与副产物果糖、葡萄糖比例为11:1:1。

本发明公开了一种磷酸酶突变体及在体外多酶催化麦芽糊精制备果糖中的应用，所述突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸的第173位、175位或179位进行单点突变获得的。本发明以含磷酸酶突变体编码基因的工程菌发酵培养获得的湿菌体经超声破碎提取的酶液为催化剂，以麦芽糊精为底物，联合葡聚糖磷酸化酶、葡萄糖磷酸变位酶、葡萄糖磷酸异构酶，添加MgCl2和磷酸盐，以pH为7.5～8.5的缓冲液为反应介质构成反应体系，制备果糖，转化率达到70％以上，产物中果糖与副产物葡萄糖比例为11:1。底物专一性调控后的磷酸酶突变体在体外多酶合成系统生产果糖的绿色合成中具有重要工业应用潜力。

本发明提供了一种立体选择性重组酯酶、编码基因、载体、工程菌及其拆分(R,S)‑吲哚啉‑2‑甲酸乙酯的应用；利用重组大肠杆菌或重组酯酶为生物催化剂同时催化拆分(R,S)‑吲哚啉‑2‑甲酸乙酯，生成(S)‑吲哚啉‑2‑甲酸，转化率达45％左右，产物光学纯度都在96％以上。

本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及球孢白僵菌类钙调磷酸酶B亚基BbCNB、A亚基BbCNA基因在棉花和烟草育种中的应用。本发明通过构建上述基因的超量表达载体并整合到棉花和烟草基因组中，提高棉花和烟草植株的耐盐性。本发明还提供了改良棉花和烟草种子的植物表达载体，包括球孢白僵菌类钙调磷酸酶B亚基BbCNB、A亚基BbCNA基因编码的蛋白质，或表达该蛋白质的元件，或表达该蛋白质的载体，或表达该蛋白质的宿主细胞。本发明所述的球孢白僵菌类钙调磷酸酶B亚基BbCNB、A亚基BbCNA基因可以提高棉花和烟草的耐盐性，为棉花和烟草育种提供一种新选择。