本发明公开了从乳酸合成纯聚乳酸的大肠杆菌工程菌及其制备方法和应用，大肠杆菌工程菌构建了由丙酰辅酶A转移酶突变体基因和聚羟基脂肪酸酯合成酶突变体基因融合表达构成的聚乳酸合成途径而获得。本发明并能够实现在生物体内以乙酰辅酶A为起始代谢物向聚乳酸的转化。本发明提供的突变体菌株内表达本发明提供的编码组成聚乳酸合成代谢途径中所有的酶的基因获得。本发明所构建的重组大肠杆菌菌株在兼性厌氧的条件下可利用含葡萄糖或甘油的丰富培养基为原料合成16％细胞干重。
📄 2021116809016
📂 C12N1_21
👤 淮阴工学院
📅 2021-12-31
本发明公开了一种产两性霉素B的重组结节链霉菌及其应用，所述重组结节链霉菌是敲除结节链霉菌ZJB2016050(Streptomyces nodosus ZJB2016050)内两性霉素B的竞争支路后，再将SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5所示功能基因串联序列导入获得的；通过导入功能基因，使两性霉素B骨架合成前体供给量全面提升，提高菌种对营养物质的利用率，改变目标产物的营养物质流向。通过敲除竞争支路提高AmB产量约20％，副产物两性霉素A降低40％，通过过表达串联功能基因验证提高三类前体乙酰辅酶A，丙二酰辅酶A和甲基丙二酰辅酶A大幅提升两性霉素B的产量，最终在5L发酵罐发酵，两性霉素B产量可达到16g/L。
📄 2019104512586
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2019-05-28
本发明公开了一种重组细胞及其合成α,β‑不饱和醛的应用，所述重组细胞是将烯醇脱氢酶编码基因、NADPH氧化酶编码基因和血红蛋白编码基因共同导入宿主细胞构建而成。本发明融合共表达烯醇脱氢酶、NADPH氧化酶和血红蛋白的重组细胞一锅法级联催化200mM 2‑丁烯‑1‑醇的选择性氧化，反应6h后底物完全转化为产物2‑丁烯醛，显著地提高了基因工程菌的催化效率；所述方法具有高选择性，反应过程中没有检测到过度氧化产物饱和醛、烯酸和饱和酸，避免了副产物的生成；除了氧气，不需加入其它辅底物，也不需要加入过氧化氢酶；方法绿色高效，可适合大规模工业生产。
📄 2020101189158
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2020-02-26
本发明一种L‑半胱氨酸的基因工程菌及构建方法，以及该基因工程菌在微生物发酵制备L‑半胱氨酸中的应用。本发明通过(1)强化大肠杆菌L‑半胱氨酸合成途径的丝氨酸模块，增强大肠杆菌对丝氨酸的利用能力，(2)减弱丝氨酸的转运，减弱副产物对L‑半胱氨酸合成的影响，(3)增加硫模块合成基因的表达(4)质粒上异源表达Corynebacterium glutamicum的serC基因，得到L‑半胱氨酸高产的大肠杆菌基因工程菌株，L‑半胱氨酸产量从2.7g/L提高到3.83g/L。
📄 2019114092389
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2019-12-31
本发明公开了一种产两性霉素B的重组结节链霉菌及其应用，所述重组结节链霉菌是敲除结节链霉菌ZJB2016050(Streptomyces nodosus ZJB2016050)内两性霉素B的竞争支路获得的；通过导入功能基因，使两性霉素B骨架合成前体供给量全面提升，提高菌种对营养物质的利用率，改变目标产物的营养物质流向。通过敲除竞争基因簇提高两性霉素B的产量，可提高两性霉素B产量25％，提高菌种在发酵过程中对培养基营养成分的利用率，缩短发酵周期从而降低染菌风险。
📄 2019104508275
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2019-05-28
本发明公开了一种产D‑泛酸的基因工程菌及应用，所述基因工程菌通过以下步骤构建获得：(1)以保藏号为CCTCC NO：M2018914的大肠杆菌为出发菌株，敲除aceF和mdh两个基因，获得菌株DPA02；(2)将来源于谷氨酸棒状杆菌的panB与panC基因，以及ppnk基因在菌株DPA02中过表达获得产D‑泛酸的基因工程菌。本发明产D‑泛酸的基因工程菌的D‑泛酸的产量在摇瓶发酵中提高至6.89g/L，提高了80％；同时，利用20％溶氧反馈补料结合甜菜碱添加的分批补料发酵策略使5L发酵罐中D‑泛酸积累量提高至68.3g/L，糖酸转化率达到0.36g/L。
📄 2021107275768
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2021-06-29
本发明公开了一种产两性霉素的重组结节链霉菌及其应用，所述重组结节链霉菌是将SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4与SEQ ID NO.5所示的透明颤菌血红蛋白(Vhb)、S-腺苷甲硫氨酸合成酶(Metk)、两性霉素合成基因簇调控因子(AmphRIV)、次级代谢产物全局调控因子(AraC)以及红霉素强启动子ermE*p序列导入结节链霉菌(Streptomyces nodosus)ZJB2016050获得。通过导入并过表达上述基因，使重组结节链霉菌中，两性霉素B产量提高约45％，副产物两性霉素A产量降低60％，并缩短在发酵过程中菌体生长周期，达到提升生产效率的目的。
📄 201810147126X
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2018-02-12
本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种高产L‑高丝氨酸的无质粒重组大肠杆菌及其应用。本发明提供的产L‑高丝氨酸的无质粒重组大肠杆菌，以Escherichia coli HS33为底盘细胞经代谢工程和基因编辑技术改造得到，相比于底盘菌株能够更好的利用葡萄糖等碳源物质进行L‑高丝氨酸的生产，在发酵生产L‑高丝氨酸的水平相比于出发底盘菌株从35.57g/L提高到75g/L。发酵成本低，产物浓度高，没有副产物影响，产物易于纯化，适用于工业应用。
📄 2023102089292
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2023-03-07
本发明公开一种高产D‑泛酸的基因工程菌及其应用，本发明通过回补底盘菌DPA11已经敲除的ilvA基因，利用起始密码子TTG替换ilvE的起始密码子GTG，利用Trc启动子替换serA、glyA、ilvB、ilvN、pntA、pntB和cyo的原始启动子，再在质粒上异源过表达来源于谷氨酸棒状杆菌的panB和panC，得到D‑泛酸高产的大肠杆菌基因工程菌株，该菌株在摇瓶水平上D‑泛酸的产量达到了6.81g/L，是原始出发菌株的3.83倍，并且避免了外源添加异亮氨酸，节约成本，同时发酵罐放大培养节约大量的时间成本。
📄 2021112954646
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2021-11-03
本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种高产O‑乙酰‑L‑高丝氨酸的重组大肠杆菌及其应用。本发明提供的高产O‑乙酰‑L‑高丝氨酸的重组大肠杆菌由以下改造策略的组合获得：在大肠杆菌W3110中将编码高丝氨酸O‑乙酰基转移酶的metX基因整合至编码L‑精氨酸ABC转运体ATP结合亚基的artP基因位点，再依次敲除编码磷酸乙酰基转移酶的patZ基因、编码转录反终止子和mRNA稳定性调节子的cspC基因，随后将编码ATP‑NAD激酶的ppnK基因整合至编码NADPH依赖性醛还原酶的yahK基因位点，最后将编码乙酰辅酶A合成酶acs基因启动子替换为Ptrc启动子得到重组大肠杆菌。使用该重组大肠杆菌发酵生产O‑乙酰‑L‑高丝氨酸具有产量高的优势。
📄 2023102597393
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2023-03-17
本发明涉及一种高产D‑泛酸的基因工程菌、构建方法，及其在微生物发酵制备D‑泛酸中的应用。本发明通过对大肠杆菌的有机酸合成途径相关基因进行了阻断，减少有机酸的副作用及增加丙酮酸池的积累，加强丙酮酸合成途径基因pykA，加强丙酮酸积累，解除关键酶的负反馈抑制，解决D‑泛酸合成的瓶颈步骤，改善糖摄取能力，增加了前体丙酮酸的积累，过表达基因lpd、ilvD改善主路合成途径基因的表达情况，最终获得更高产D‑泛酸工程菌，无需质粒引入外源酶增强关键酶酶活，摇瓶发酵产量达到3.99g/L；敲除阻遏蛋白编码基因lacI后形成组成型表达，并进行培养基优化后，摇瓶发酵产量达到4.72g/L；在5L发酵罐中分批补料发酵，产量达到34.28g/L。
📄 2021105120090
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2021-05-11
本发明提供了一种利用含转氨酶‑辅酶磷酸吡哆醛共固定化大肠杆菌(Escherichia coli，E.coli)工程菌细胞催化合成西他列汀手性中间体(3R)‑3‑氨基‑1‑[3‑(三氟甲基)‑5,6,7,8‑四氢‑1,2,4‑三唑并[4,3‑a]吡嗪‑7‑基]‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)丁‑1‑酮的方法。包括含转氨酶大肠杆菌工程菌的培养、共固定化细胞的制备、固定化细胞不对称催化西他列汀手性中间体的合成。本发明方法采用转氨酶‑PLP共固定化细胞为催化剂，稳定性好，使用寿命长，有机溶剂耐受性好，可多次重复利用，并且反应过程中无需昂贵的外源辅酶添加，大幅度降低生产成本。本方法工艺简单，成本低廉，产品产率与纯度高，在西他列汀手性中间体的工业化生产中具有极高应用价值。
📄 201910434957X
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2019-05-23
柿子坊 · 知识产权运营
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