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本发明涉及一种真空冷冻干燥膜醭毕赤酵母保护剂的方法，其特征在于包括如下步骤：将膜醭毕赤酵母接种到新鲜的NYDA培养基上，经活化48 h后再将活化好的酵母接种到NYDB（不加琼脂的NYDA）培养基中，在28°C、180 rpm条件下培养24 h，之后在1351×g、4°C条件下离心10min，弃上清液，加入无菌水，再次离心，加入无菌水，用血球计数板制成2×108 CFU/ml酵母悬浮液；保护剂悬浮液与酵母悬浮液等体积混合得到样品；分装1 mL的样品在10 mL的烧杯中，在−20°C条件下冷冻12h，之后在冷阱温度为−50°C、真空度为1–10 Pa条件下冻干。

一种人工形成干巴菌菌塘的方法，通过选取适合的林地和幼松，人工方法开掘菌塘，并在菌塘的土壤中添加高度分散的树脂微粒和干巴菌腐败提取的胺类、酰胺类物质，人工监测养护，促进干巴菌繁殖体对土壤的适应和加快形成真菌与植物共生体系的生长，形成能够使干巴菌营养体正常生长、菌丝活力旺盛的菌塘；此种方法具有操作简单、接种成活概率高、形成共生体系速度快和形成菌塘周期短的优点；利用树脂溶胶与土壤作用形成有机质和矿物质、无机盐分布的面积，提高了松树与干巴菌的信息传递速率，依靠土壤的吸附，催生更多有益于物质循环的林下微生物，增强土壤保水能力，实际加快了林地内物质和能量循环速度。

本发明涉及微生物保存技术领域，特别是关于一种微生物快速冻干保存的方法，包括：微生物活化、培养、富集得菌含量1×108cfu/mL～1×109cfu/mL的菌悬液；在菌悬液中加入权利要求1～3任一项所述微生物冻干保护，混匀得混合菌液；将球霰石碳酸钙按照重量体积比1g:0.8～2mL加入至混合菌液中混匀，快速冷冻，然后干燥即得冻干粉。本发明方法操作简便，可迅速完成对微生物的冻干保存；经本申请方法冻干保存的微生物，存活率不低于90％，显著提高了微生物的保藏期，利于微生物制剂的加工、储藏及转输，此外，还有利于提高冻干产酸菌的产酸活性，相对于常规冻干保存方法有助于维持产酸菌的生物学活性。

本发明公开了食用菌生产菌种保藏方法及其活化方法，保藏方法步骤：(1)在密闭容器内装入混合液(甘油30-50％(v/v)、石蜡油50-70％(v/v))，对混合液灭菌；(2)选择菌落无缺角的平板，选取尖端菌丝至营养贫瘠的培养基斜面培养，培养长至培养基斜面长度的4/5时，在试管中加入无菌混合液体覆盖培养基斜面及菌丝，常温保存；活化方法步骤：(1)在固体培养基中加入浓度为10-40％的海藻糖溶液，并灭菌；(2)用灼烧冷却后的接种铲挑取1cm×1cm的菌块，移至新鲜的无菌固体培养基中培养，待平板菌丝生长稳定后移入种包、生产栽培包，无异常现象后可投入生产使用；本发明方法能在常温长时间(3-5年)保藏，中途使用不会影响后续保藏，解决传统方法不足，维持菌种原有活性。