本发明涉及一种7‑DHC出胞分泌合成的酿酒酵母基因工程菌株，及其构建方法和应用。本发明构建了一株可向胞外高效转运7‑DHC的重组S.cerevisiae菌株sc13，利用其进行500mL摇瓶双相发酵时，7‑DHC总产量达到28.189mg/g(分泌量11.701mg/g)，相较于对照sc1菌株，7‑DHC总产量提升14.54倍，胞外总分泌量提升13.77倍，其中胞外7‑DHC的分泌产量占比41.51％。由本发明构建的重组菌株具有更强的外分泌能力和更高的产量，对7‑DHC的合成以及简化7‑DHC的分离提取提供了指导思路，具有广阔的应用前景。
📄 2023100585156
📂 C12N1_19
👤 浙江工业大学
📅 2023-01-18
一种耐油酿酒酵母基因工程菌及其构建方法，属于生物工程技术领域。本发明公开了一株过表达Are2和Yft2基因的同时替换SEI1及Tgl1基因的酿酒酵母基因工程菌，所述酿酒酵母由原始酿酒酵母利用同源重组技术替换基因后改造而成。由于原始菌株BY4741自身存储甾醇类物质的量有限，并且过量积累的脂质中间体会产生产物抑制作用，不仅直接影响目标产物的合成，而且会引发细胞毒性，降低细胞活力。改造后的耐油酿酒酵母基因工程菌较原始出发菌株显著提升了细胞油脂存储单元脂滴结构的体积占比，有效地降低了脂质累积引起的细胞毒性和产物抑制，显著提升了酯类化合物的胞内累积量，为突破酯类类化合物酿酒酵母从头合成极限提供了新的策略以及良好的耐受细胞模型。
📄 2021113252655
📂 C12N1_19
👤 浙江工业大学
📅 2021-11-10
本发明公开了一种高产红没药烯的酿酒酵母工程菌及应用，所述酿酒酵母工程菌按如下方法构建：在增强甘油代谢途径的酿酒酵母菌中，转入红没药烯合成酶基因Agbis，同时敲除葡萄糖阻遏转录因子MIG1，构建得到高产红没药烯的酵母工程菌。本发明在酵母工程菌中采用增强甘油利用途径和敲除葡萄糖阻遏转录因子MIG1的组合策略，使得红没药烯摇瓶产量最终提高了91.1％，达到868.6mg/L，为目前报道的甘油蔗糖合成最小培养基摇瓶发酵最高产量。
📄 202110088156X
📂 C12N1_19
👤 浙江工业大学
📅 2021-01-22
本发明公开了酿酒酵母产绿原酸工程菌株的构建及应用方法，通过多水平代谢工程策略首次实现了酿酒酵母以葡萄糖为碳源从头合成绿原酸，主要通过以下手段实现：比较关键酶奎尼酸脱氢酶YdiB活性，引入最佳来源的绿原酸合成途径；移除莽草酸合成路径中的限速因子来强化绿原酸合成的代谢流；通过平衡赤藓糖四磷酸E4P和磷酸烯醇式丙酮酸PEP之间的配比来增强前体供应；增加绿原酸合成途径中羟基肉桂酰‑CoA奎尼酸转移酶HQT和P450酶C3H拷贝数。本发明获得的工程菌株是迄今报道的微生物法产绿原酸的最高水平。
📄 2021115710361
📂 C12N1_19
👤 浙江工业大学
📅 2021-12-21
本发明具体涉及一种从头合成7‑DHC酿酒酵母基因工程菌及其构建方法与应用，属于生物技术领域。本发明以酿酒酵母工程菌SC9为出发菌株，以TY转座子多次、多拷贝tHMG1、DHCR24、ERG1，以TY转座子多拷贝ERG2、POS5、ERG7、ERG11、IDI1、ERG3，以及在基因组上单拷贝POS5、ERG3、DHCR24，提高胞内还原性辅酶Ⅱ含量及加强7‑DHC合成主路径。基因组单拷贝ACL、ACS1、ERG10、ERG19等以加强酿酒酵母乙醇的利用及动态调控7‑DHC的合成。由本发明构建的酿酒酵母基因工程菌株具有较高的产物累积，为替代传统多步化学合成路线，实现工业化生产奠定基础。
📄 2024118761392
📂 C12N1_19
👤 浙江工业大学
📅 2024-12-19
本发明公开了一种重组酿酒酵母工程菌及在合成纳米硒中的应用，所述重组酿酒酵母工程菌是将Sec13p基因、Sso1p基因插入酿酒酵母的单拷贝位点YPRCΔ15构建获得的。本发明提高了酿酒酵母囊泡运输的两个基因Sec13p和Sso1p，对纳米硒的囊泡运输机制进行强化，提高纳米硒颗粒的外排作用，简化纳米硒颗粒与酿酒酵母的分离纯化步骤，为工业上生产纳米硒颗粒减少成本，提高产量。
📄 2021115778025
📂 C12N1_19
👤 浙江工业大学
📅 2021-12-22
本发明公开了一种高产丙酮酸的解脂耶氏酵母工程菌、构建方法及应用，所述解脂耶氏酵母工程菌WSMHP是将解脂耶氏酵母基因组中草酰乙酸转运蛋白编码基因Oac1p敲除，同时过表达丙酮酸脱羧酶编码基因Pyc2和磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶编码基因Pck1。本发明提供的解脂耶罗酵母工程菌WSMHP与出发菌株解脂耶罗酵母出发菌株YW100‑1相比，以甘油为唯一碳源时，丙酮酸产量增加了39.0％，达到168.9g/L，为丙酮酸工业化生产提供了优良菌株。
📄 2022109496685
📂 C12N1_19
👤 浙江工业大学
📅 2022-08-09
本发明涉及一种高表达DNase I的重组毕赤酵母菌及其构建方法与应用。本发明DNase I的表达系统，包括宿主细胞和转化入宿主细胞的表达载体，所述表达载体包括插入有DNase I的第一表达载体和插入有分子伴侣的第二表达载体，所述宿主细胞为毕赤酵母GS115。本发明的有益效果主要体现在：(1)DNase I酶可以降解宿主的DNA，因此对表达宿主有一定的毒性。毕赤酵母可以采用分泌表达的形式将合成的DNase I蛋白运输到胞外，减少DNase I对宿主的毒性，从而提高DNase I的体积表达量。(2)毕赤酵母本身分泌的蛋白比较少，因此如果目的蛋白能有效表达，下游纯化过程将会较为简单。(3)采用PCI共表达的方法，显著提高了DNase I的产率，由于PCI采用胞内表达的形式，不会被分泌到胞内，因此不会影响培养基中DNase I蛋白的纯化步骤。
📄 2022107919882
📂 C12N1_19
👤 浙江工业大学
📅 2022-07-05
本发明提供一种高产植物鞘氨醇的酿酒酵母菌株，本发明在高产植物鞘氨醇的酿酒酵母的基础上，构建高效合成植物鞘氨醇的酿酒酵母工程菌株，将LCB4、SHM2、CHA1、ORM2、ELO3、SHM1基因编码的蛋白质的表达降低和利用组成型启动子将TSC10、SYR2、LCB2基因编码蛋白质的表达提高，植物鞘氨醇摇瓶量达到9.52mg/g干重，再通过组成型启动子将HAC1基因编码蛋白质的表达提高，植物鞘氨醇摇瓶量进一步提高了4.34倍，达到41.33mg/g干重，植物鞘氨醇产量达到为目前报道的摇瓶发酵最高产量。5L发酵罐发酵产植物鞘氨醇的产量达到了150.54mg/g干重，滴度为2817mg/L。
📄 2023100381816
📂 C12N1_19
👤 浙江工业大学
📅 2023-01-10
本发明公开了一种重组解脂耶氏酵母工程菌株及其构建方法和应用。本发明，以琥珀酸脱氢酶的Sdh5亚基为目标，借助基因组的同源壁替换完成基因的敲除，使TCA循环中的琥珀酸脱氢酶复合体失去活性，琥珀酸无法下一步代谢而得到积累，利用甘油作底物好氧发酵生产琥珀酸，通过在敲除解脂耶氏酵母sdh5基因的基础上进一步敲除乙酰辅酶A水解酶(acetyl-CoA hydrolase)编码基因ach1，不仅使得新构建的重组解脂酵母乙酸产量大幅下降，而且重组解脂耶氏酵母的发酵性能获得极大提升，包括生长速率和发酵生物量的提高，同时琥珀酸的产量和产率得到提高。
📄 2016109371951
📂 C12N1_19
👤 临沂大学
📅 2016-11-01
本发明公开了一种利用强启动子高效全合成羟基酪醇的重组解脂亚罗酵母菌的构建方法，将TYR1、ARO10、ADH和HpaBC目的基因整合至解脂亚罗酵母菌的染色体上，并利用新型强TDH3启动子突变体高效驱动这些外源基因在解脂亚罗酵母菌中特异性表达，提高了重组表达效率，进而有效提高了重组解脂亚罗酵母菌合成羟基酪醇的能力，提高了羟基酪醇的产量。本发明重组解脂亚罗酵母菌的构建方法操作简单，成本低廉，该菌株可以以葡萄糖为底物全合成羟基酪醇，有效解决羟基酪醇产量不足，价格昂贵的问题。
📄 2021102921186
📂 C12N1_19
👤 陕西师范大学
📅 2021-03-18
本发明公开了一种高温好氧条件下产甘油的耐热酵母工程菌的构建及其应用，是以耐热性马克斯克鲁维酵母为平台，利用基因工程、代谢工程等方法，构建一株磷酸丙糖异构酶(TPI1)缺失的菌株，所构建菌株具备高温好氧条件下高效利用葡萄糖、果糖、木糖高效生产甘油的能力。本发明获得的马克斯克鲁维酵母菌株YZB115在42℃好氧条件下，分别利用80g/L葡萄糖、果糖和木糖产生40.32、41.84和18.64g/L甘油，其生产速率分别为0.84、0.50和0.22g/L/h，得率分别为0.50、0.50和0.23g/g，所构建工程菌株发酵过程不产生副产物乙醇，利用木糖发酵产甘油结束时不积累木糖醇。
📄 2020100247546
📂 C12N1_19
👤 淮北师范大学
📅 2020-01-10
柿子坊 · 知识产权运营
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