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发明专利
已授权
一种维氏气单胞菌突变株的制备方法及应用
📄 申请号:CN202410565702.8
📄 发布日:2026/08/04
著录项目信息
申请日
2024-05-09
公开号
CN118308281B
公开日
2025-07-25
申请人
西南大学
法律状态
已下证
专利类型
发明
主分类号
C12N1_21
IPC 分类号
C12N1_21
,
C12N15_31
,
C12N15_74
,
A61K39_02
,
A61P31_04
,
C12R1_01
,
技术画像
所属领域
微生物育种
微生物育种
基因工程
菌株构建
应用场景
生物医药, 水产养殖, 环境治理, 食品工业, 农业
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摘要
本发明公开了一种维氏气单胞菌突变株的制备方法及应用,属于微生物技术领域,所述制备方法包括以下步骤,S1、提取维氏气单胞菌全基因组;S2、构建cheZ/mshK/aerA基因敲除所使用的引物;S3、以所提取的维氏气单胞菌全基因组为模板,使用引物进行目的基因上下游同源臂扩增和重叠延伸,得到缺失后的cheZ/mshK/aerA基因片段;S4、缺失后的cheZ/mshK/aerA基因片段导入自杀质粒pRE112,得到重组质粒pRE112‑ΔCMA;S5、将重组质粒pRE112‑ΔCMA转入WM3064感受态细胞,通过接合转移构建同源重组突变株,再通过蔗糖压力筛选,得到所述维氏气单胞菌突变株ΔCMA。本发明通过分子克隆技术、Overlap PCR技术和同源重组技术,利用自杀载体对维氏气单胞菌cheZ/mshK/aerA基因进行框内缺失突变,获得三基因缺失的且能稳定遗传的维氏气单胞菌突变菌ΔCM。
权利要求书 (12项)
说明书
附图
……
……
图1
图2
图3
法律状态时间线
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