摘要
本发明公开了一种羰基还原酶BsCR突变体、工程菌及合成克唑替尼手性中间体的应用,本发明羰基还原酶BsCR突变体的活性和稳定性明显提高。本发明所获得的突变体比酶活与野生型BsCR相比显著提高,其中BsCRM2突变体在45℃半衰期为52.1h,相比于母本WT‑BsCR提升了2.9h,比活性与野生型BsCR相比提高了87.7倍,最高底物投料量可达到100g/L 2,6‑二氯‑3‑氟苯乙酮(CFA),产物浓度随反应时间的延长而逐渐增加,6h内绝大部分底物可被转化(底物转化率为92.06%),产物e.e.值始终保持在99.5%以上,时空产率为368.24g/L/d。