本发明筛选得到一种耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体,增强了突变酶的半衰期,提高了酶对合成D‑阿洛酮糖所用底物D‑果糖的底物亲和力和转化效率,突变体酶A13S在50℃时的t1/2值300min,Tm值由野生酶的55.1℃分别上升为60.8℃,突变体酶最适温度上升为80℃,与野生酶相比提高了20℃;本发明通过突变改善野生酶高温下半衰期过短问题,突变酶相对作用时间长,扩展了相对稀少的酶库,展示了D‑果糖在合成D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶绿色环保、毒性低,副产物少的技术优势,克服了化学合成法易产生三废问题,具有重要的工业应用前景。
📄 2022117047654
📂 C12N9_90
👤 浙江工业大学
📅 2022-12-29
本发明涉及生物技术领域,公开了一种蔗糖异构酶突变体及其在制备异麦芽酮糖中的应用。本发明通过对来源于Serratia symbiotica的蔗糖异构酶的氨基酸序列进行第149位、第222位、第297位的单点或上述任意多点组合突变,使得得到的蔗糖异构酶突变体用于催化蔗糖制备异麦芽酮糖的催化效率得到提高,具体体现为异麦芽酮糖选择性提升及酶活的提升。在异构化蔗糖生成异麦芽酮糖时,上述突变体对产物异麦芽酮糖的选择性明显提高。同时,上述蔗糖异构酶突变体催化活力也有所提高,因此,上述蔗糖异构酶突变体催化制备异麦芽酮糖效率高,反应时间短。
📄 2025101090376
📂 C12N9_90
👤 浙江工业大学
📅 2025-01-23
本发明涉及一种L-阿拉伯糖差向异构酶突变体,及其在微生物催化D-半乳糖异构化制备D-塔格糖中的应用。所述L-阿拉伯糖差向异构酶突变体,由所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第97位、(2)第189位、(3)第301位、(4)第409位和(5)第462位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的差向异构酶及其突变体,以及其在制备塔格糖(D-tagatose)中的应用。该突变体具有高最适反应温度80℃,解决了现有酶无法在高温生产D-tagatose的技术难题。使用本突变体生产D-tagatose,底物浓度为600g/L时,产物得率最高可达79.7%,优于原始酶和其他突变酶的转化效果,具有较好工业应用前景。
📄 2019113839722
📂 C12N9_90
👤 浙江工业大学
📅 2019-12-28
本发明涉及一种新型耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及突变体,及其在微生物催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖(D‑psicose)中的应用。所属异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示;所述异构酶突变体由SEQ ID NO.3所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第106位、(2)第183位、(3)第211位、(4)第276位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体,该突变体具有超高酶活和底物转化率,最适反应温度可达90℃。当底物浓度为700g/L,反应温度为85℃时,产物得率最高达67.14%。将重组酶进行固定化并连续催化300批次,转化率均大于67%。本发明解决了现有酶催化制备D‑psicose效率低下的难题,获得的优于文献报道的连续转化效果对提升D‑psicose工业化水平具有重要意义。
📄 2019113848952
📂 C12N9_90
👤 浙江工业大学
📅 2019-12-28
本发明涉及一种新型L-阿拉伯糖异构酶(LAI)及其突变体,及其在连续催化D-半乳糖异构化制备D塔格糖(D-tagatose)的应用。所述异构酶突变体,由SEQ ID NO.1所示所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第107位、(2)第199位、(3)第59位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的LAI及其突变体,85℃,700g/L D-半乳糖反应体系下,产物得率最高达89.2%。将重组酶进行固定化并连续催化200批次,转化率均仍大于89%。本发明解决了现有酶催化制备D-tagatose效率低下的难题,获得的优于文献报道的连续转化效果对提升D-tagatose工业化水平具有重要意义。
📄 2019113840838
📂 C12N9_90
👤 浙江工业大学
📅 2019-12-28
本发明涉及一种具备D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶功能的耐高温TIM barrel蛋白突变体,及其在催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖中的应用。所述TIM Barrel蛋白突变体,由序列如SEQ ID NO.1所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第241位、(2)第182位、(3)第201位、(4)第105位、(5)第30位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的TIM Barrel蛋白酶突变体,该突变体具有超高酶活、较高最适反应温度和底物转化率,解决了现有酶催化制备D‑psicose效率低下的技术难题。使用本突变体生产D‑psicose,产物得率最高可达53.68%,优于原始酶和其他突变酶的转化效果,具有较好工业应用前景。
📄 2019113785135
📂 C12N9_90
👤 浙江工业大学
📅 2019-12-27
本发明涉及一种L‑阿拉伯糖差向异构酶突变体,及其在微生物催化D‑半乳糖异构化制备D‑塔格糖中的应用。所述L‑阿拉伯糖差向异构酶突变体,由所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第304位、(2)第75位、(3)第274位、(4)第167位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的L‑阿拉伯糖差向异构酶及其突变体,该突变体具有高最适反应温度75℃,其酶活与原始酶相比提高280%。使用本突变体生产D‑tagatose,产物得率最高可达73.3%。将重组酶进行固定化并连续催化30批次,转化率均大于73%。该突变体的转化水平展示了优良的工业应用前景。
📄 201911384932X
📂 C12N9_90
👤 浙江工业大学
📅 2019-12-28
本发明涉及一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体,及其在微生物催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖中的应用。所述D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体,由所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第242位、(2)第105位、(3)第210位、(4)第147位、(5)第184位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及其突变体,该突变体具有高最适反应温度85℃,解决了现有酶无法在高温生产D‑psicose的技术难题。使用本突变体生产D‑psicose,产物得率最高可达40.1%,优于原始酶和其他突变酶的转化效果,具有较好工业应用前景。
📄 2019112047209
📂 C12N9_90
👤 浙江工业大学
📅 2019-11-29
本发明涉及一种具有较高热稳定性的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及其突变体A13S/V235I以及编码基因,以及在微生物催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖中的应用,解决了目前D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶在工业生产中热稳定性差的技术问题。所述D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体由SEQ ID NO.2所示氨基酸经定点突变而得。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的热稳定性提高的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及其突变体,该突变体具有高最适反应温度70℃,解决了现有酶无法在高温生产或其在高温下迅速失活的阻碍制备D‑psicose的技术难题。热稳定性优于原始酶和其他突变酶,具有较好工业应用前景。
📄 2022117047739
📂 C12N9_90
👤 浙江工业大学
📅 2022-12-29
本发明涉及生物技术领域,本发明公开了一种羟胺苯变位酶突变体及其应用。本发明通过将来源于Pseudomonas oleovorans的野生型羟胺苯变位酶序列进行第115位、93和81位的突变,筛选得到羟胺苯变位酶突变体,突变体在催化3‑羟基氨基乙酰苯转化为3‑氨基‑2‑羟基苯乙酮的过程中,相较于野生型酶活力大大提高,最大可从0.176U提高至1.40U。本发明提供羟胺苯变位酶突变体在3‑氨基‑2‑羟基苯乙酮的生物合成中具有较大工业前景。
📄 202310522492X
📂 C12N9_90
👤 浙江工业大学
📅 2023-05-10
本发明公开了一种耐高温纤维二糖差向异构酶突变体及其应用,所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第242位进行单突变获得的。本发明通过对来自Dictyoglomus thermophilum的纤维二糖差向异构酶(DiCE)进行分子改造,从中筛选出热稳定性提高的突变体,得到的突变体乳果糖转化效率显著提高,其中突变体A242L耐受80℃温度,乳果糖转化率为64.41%,具有良好的工业应用前景。
📄 2024116813744
📂 C12N9_90
👤 浙江工业大学
📅 2024-11-22
本发明公开了一种提高植物类胡萝卜素积累和耐盐性相关蛋白AeLCYE及其编码基因与应用。本发明提供一种蛋白,是(a)或(b):(a)由序列表中序列SEQ ID NO 2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列表中序列SEQ ID NO 2所示的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物抗逆性相关的由序列SEQ ID NO 2衍生的蛋白质。本发明将蛋白的编码基因导入拟南芥中,转基因拟南芥中类胡萝卜素含量显著提高,同时提高转基因拟南芥植株的耐盐性。类胡萝卜素生物合成和抗逆性相关蛋白AeLCYE及其编码基因在调控植物类胡萝卜素生物合成以及耐盐性中具有重要价值。
📄 202211702301X
📂 C12N9_90
👤 淮阴工学院
📅 2022-12-28