本发明涉及一种胺氧化酶NDAO，所述胺氧化酶NDAO的氨基酸序列为SEQ ID NO.1。本发明的胺氧化酶NDAO对HFB1的降解率为100％；本发明胺氧化酶NDAO性质优良，该酶可以应用于农业、饲料和食品等工业，减少伏马毒素FB1对动物及人类健康的危害。
📄 2021111336336
📂 C12N9_06
👤 天津科技大学
📅 2021-09-27
本发明涉及一种草铵膦脱氢酶突变体及其编码基因，以及利用该突变体构建的基因工程菌菌及其在催化PPO制备L‑草铵膦中的应用。所述突变体氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，编码基因如SEQ ID No.2所示。本发明构建的基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pETDuet‑1‑PPTGDHE3(A164G‑V354A‑R205K)‑GDH，具有高产草铵膦脱氢酶的性质，用于发酵罐生产，最高酶活力可达6605U/L，可用于微生物催化PPO制备L‑草铵膦，大大节约了成本，具有十分重要的产业价值和显著的社会效益；含草铵膦脱氢酶的固定化全细胞用于催化PPO生产L‑草铵膦，重复使用20次后，固定化细胞仍能保持100％的转化率，具有良好的工业化应用前景。
📄 2021110220135
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2021-09-01
本发明公开了双辅酶依赖型草铵膦脱氢酶突变体及其在催化合成L-草铵膦中的应用，该双辅酶依赖型草铵膦脱氢酶突变体，其特征在于，所述突变体由SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的第91位、第111位、第240位和第261位进行多点突变后获得。本发明不仅改变了草铵膦脱氢酶突变体的辅酶依赖性，由原来NADPH依赖性改为NADH/NADPH双依赖性，而且也对草铵膦脱氢酶催化活性进行了改造，活力有了较大提升，并将突变体进一步组合，获得了高活力菌株，催化制备的L-草铵膦转化率高、收率高、产物易于分离提纯且显著缩短了反应进程。
📄 202010644394X
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2020-07-07
本发明公开了一种草铵膦脱氢酶突变体、基因工程菌及一锅法多酶同步定向进化方法。所述草铵膦脱氢酶突变体由来源于荧光假单胞菌的草铵膦脱氢酶第164位氨基酸由丙氨酸突变为甘氨酸所得，第205位精氨酸突变为赖氨酸，第332位苏氨酸突变为丙氨酸获得的所得，氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。所述基因工程菌为将所述草铵膦脱氢酶突变体的基因导入宿主细胞。宿主细胞中还可以将葡萄糖脱氢酶的编码基因或甲酸脱氢酶的编码基因也导入，进行同步定向进化，使双基因过表达。本发明一锅法多酶同步定向进化方法可以筛选到活性大大提高的基因工程菌。本发明L‑PPT制备方法与转氨酶等催化工艺相比，工艺相对简单，原料转化率高，转化率可达100％，且立体选择性高。
📄 2020106149513
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2020-06-30
本发明提供了一种脯氨酸脱氢酶、基因和突变体及其应用。该酶来源于Pseudomonas xantholysinigenes并在大肠杆菌中重组表达，构建质粒时对目的基因进行了密码子优化，优化后的DNA序列如SEQ ID NO.2所示。对该脯氨酸脱氢酶做了突变改造。该酶及其突变体可用于高效催化L‑脯氨酸降解从而完成对DL‑脯氨酸的生物拆分，得到高纯度的D‑脯氨酸，在D‑脯氨酸的绿色生产领域有很大的经济价值。
📄 2025102029888
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2025-02-24
本发明公开了一种天冬氨酸氧化酶突变体、工程菌及其在氧化‑还原偶联制备精草铵膦中的应用，以D,L‑草铵膦为底物，在有氧环境及过氧化氢酶存在的情况下，利用氨基酸氧化酶突变体或含有氨基酸氧化酶突变体的细胞作为生物催化剂，进行氧化反应，获得L‑草铵膦的前体酮2‑羰基‑4‑[羟基(甲基)膦酰基]丁酸。2‑羰基‑4‑[羟基(甲基)膦酰基]丁酸再在草铵膦脱氢酶的作用下，催化生成L‑草铵膦，本发明方法原料转化率和收率高，产物易于分离提纯且手性纯度较高；与其他催化工艺相比，工艺相对简单，转化率高达99％。
📄 2020106495520
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2020-07-08
本发明公开了一种D-氨基酸氧化酶突变体及其应用，该突变体由SEQ ID No.1所示氨基酸的第52位、第54位、第58位、第213位和第335位进行单突变或多突变获得；其中，第52位的甘氨酸突变为亮氨酸，第54位的天门冬酰胺突变为缬氨酸，第58位的苯丙氨酸突变为谷氨酰胺，第213位的蛋氨酸突变为丝氨酸，第335位的丝氨酸突变为甘氨酸。本发明通过利用定点饱和突变技术对SEQ ID No.2所示的D-氨基酸氧化酶基因进行突变，获得酶活和产物转化率远高于野生型的突变体，提高了4-(羟基甲基磷酰基)-2-羰基-丁酸生产工艺中的产物收率。
📄 2018116189420
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2018-12-28
本发明公开了一种草铵膦脱氢酶突变体及其在多酶偶联生产2-氨基-4-(羟基甲基氧膦基)-L-丁酸铵中的应用，所述草铵膦脱氢酶突变体是将SEQ ID No.2、SEQ ID No.4、SEQ ID No.6所示氨基酸第375位进行单突变获得的。本发明制备的草铵膦脱氢酶突变体DyGDH-V375S的比酶活较母本草铵膦脱氢酶提升了11-12倍，最大底物2-氨基-4-(羟基甲基氧膦基)-D/L-丁酸铵投料达到800mM，该草铵膦脱氢酶突变体更具工业应用前景。
📄 2019107512499
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2019-08-15
本发明公开了一种草铵膦脱氢酶突变体及其合成L‑草铵膦的应用，该方法以2‑羰基‑4‑(羟基甲基膦酰基)丁酸或其盐为底物，在无机氨基供体及还原型辅酶存在的条件下，利用草铵膦脱氢酶或含有草铵膦脱氢酶的细胞作为生物催化剂，进行还原胺化反应，获得L‑草铵膦。本发明方法原料转化率和收率高，产物易于分离提纯且手性纯度较高；与其他催化工艺相比，工艺相对简单，原料转化率高达100％。
📄 2018116217100
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2018-12-28
本发明公开了一种磷排放限制下重组草铵膦脱氢酶工程菌的高密度发酵方法，将重组草铵膦脱氢酶工程菌接种至发酵培养基中，在初始通气量为5L/min、初始搅拌转速300rpm、初始溶氧为100％的条件下，37℃发酵培养至OD600值为8‑10，向发酵液中加入终浓度5‑15g/L乳糖，通过补料培养基和甘油调节pH，发酵培养至OD600在100‑120之间，将发酵液离心，获得含重组草铵膦脱氢酶的湿菌体；本发明不需要添加磷酸调节pH值，对环境污染小，废水处理更容易，发酵液中磷浓度1.15×103mg/L，OD600达到100‑120之间，菌体在60℃稳定性相对于磷酸调pH值提高了1.6倍。
📄 2020115199916
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2020-12-21
本发明涉及一种催化性能显著提高的D‑氨基酸氧化酶突变体、编码基因，含有编码基因的载体、基因工程菌，以及所述突变体在微生物催化制备L‑草铵膦中的应用。所述D‑氨基酸氧化酶突变体由SEQ ID NO.1所示氨基酸经单点突变或多点联合突变获得。本发明的有益效果主要体现在：本发明提供了酶活性和酶热稳定性均有所提高的D‑氨基酸氧化酶突变体，该突变体反应4h后，PPO的转化率与野生型相比，提高20倍，可用于微生物催化制备L‑草铵膦，利于工业化生产，具有较好应用前景。
📄 2023100341999
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2023-01-10
本发明公开了一种草铵膦脱氢酶突变体、工程菌、固定化细胞及应用，所述突变体是将SEQ ID No.2所示草铵膦脱氢酶氨基酸序列的第145位、第384位、第348位、第292位、第202位、第70位、第78位进行单突变或多突变获得的。本发明草铵膦脱氢酶突变体与甲酸脱氢酶共表达工程菌的固定化细胞，以2‑羰基‑4‑(羟基甲基膦酰基)‑丁酸底物催化还原为L‑草铵膦，实现不对称合成L‑草铵膦，无需昂贵的化学拆分试剂，提高其热稳定性和操作稳定性，实现重复使用。固定化细胞酶活为162.5U/g，酶活回收率为78.1％，可以通过过滤回收，并可重复使用20批次以上保持100％转化率，极大降低了生产成本。
📄 2021116466637
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2021-12-30
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