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本发明涉及酶工程技术领域，公开了一种泛酸合成酶突变体及其应用。本发明通过对来源于大肠杆菌的泛酸合成酶的第62位、第123位、第189位氨基酸进行定点突变，通过活性口袋附近丙氨酸扫描策略，定点定向突变改变蛋白质氨基酸残基，将第62位笨丙氨酸突变为异亮氨酸和/或第123位氨基酸精氨酸突变为谷氨酰胺和/或第189位精氨酸变为异亮氨酸，提高泛酸合成酶催化D‑泛醇的效率，提高D‑泛醇的产量。最终，当上述位点同时突变时，泛酸合成酶的重组大肠杆菌可将泛酸合成酶催化D‑泛醇合成的效率提升1.32倍，携带了所构建的泛酸合成酶突变体的基因工程菌株在摇瓶发酵泛醇中产量提升3.65倍。

本发明公开了一种泛酸合成酶突变体、编码基因、载体及应用，属于酶工程技术领域。本发明的泛酸合成酶突变体泛酸合成酶突变体，由氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的泛酸合成酶的第5位和/或第176位氨基酸经定点突变获得。本发明通过多序列氨基酸比对，进行定点突变，提高泛酸合成酶的催化效率，进一步提高泛酸合成酶产量。本发明构建的泛酸合成酶的重组大肠杆菌可将泛酸合成酶酶活较出发菌株提高1.25倍。改造后的基因工程菌产酶能力显著提高，摇瓶发酵生产泛酸合成酶酶活达到144.266U/mL，更适合工业应用，可降低生产成本，提高生产效率。

本发明提供E3泛素连接酶TRIM21在制备预防或治疗新型冠状病毒（SARS‑CoV‑2）药物中的应用。研究发现，E3泛素连接酶TRIM21在体内外对SARS‑CoV‑2 N蛋白均有降解作用，有开发成为预防或治疗新型冠状病毒（SARS‑CoV‑2）药物的潜力。

本发明属于酶催化应用技术领域，特别涉及一种催化反应中酶循环使用的方法。本发明经过透析袋预处理、透析反应器组装、底物体系制备、透析反应、离心等步骤实现酶循环使用。本发明所提供的方法具有过程简单、稳定、易于放大，设备投资成本低，生产成本低，酶完全回收，催化转化率高等特点。采用本发明方法循环使用的酶具有酶活力高、性能稳定等特点。本发明提供的方法，可广泛应用于医药、食品、化工、环境处理等行业的催化反应中。