本发明公开了一种重组酯酶、编码基因、工程菌及在生产R‑酮洛芬中的应用，所述重组酯酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明将含重组酯酶编码基因的工程菌经诱导发酵得到的湿菌体用缓冲液重悬后超声破碎提取的纯酶液为催化剂，以(R,S)‑酮洛芬乙酯为底物，以pH7.0‑9.0的缓冲溶液为反应介质构成反应体系，在20～60℃、120～240rpm条件下进行水解拆分反应，获得R‑酮洛芬，当底物浓度为1g/L时，30℃反应3h，得率为37.6％，产物的光学纯度为85.5％，手性选择性为R‑型。
📄 2022111623369
📂 C12N9_18
👤 浙江工业大学
📅 2022-09-23
本发明涉及一种羧酯酶及其编码基因，以及由该编码基因构建的基因工程，以及其在微生物催化制备S‑萘普生中的应用。所述羧酯酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因核苷酸核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。利用该基因构建工程菌进行酶法立体选择性催化生产S‑萘普生，具有时空产率高，效果稳定的特点，在较短时间内可以获得转化效率可达到48%以上，光学纯度可达到99%以上，对实现高产量高纯度的S‑萘普生生产具有重要意义。
📄 2022102030754
📂 C12N9_18
👤 浙江工业大学
📅 2022-03-03
本发明公开了一种酯酶突变体、工程菌及在拆分R,S‑2,6‑二甲基苯基氨基丙酸甲酯中的应用，本发明提供的酯酶突变体的编码基因能够在大肠杆菌中进行克隆和表达，突变酯酶对R,S‑2,6‑二甲基苯基氨基丙酸甲酯有高的R‑选择性。利用突变酯酶WZest‑W23T重组菌湿菌体催化水解底物，底物浓度5g/L，反应10min，底物的转化率达到了44.64％，产物R‑2,6‑二甲基苯基氨基丙酸的eep值为94.70％，对映体选择率E值达到85.0。
📄 2025100668552
📂 C12N9_18
👤 浙江工业大学
📅 2025-01-16
本发明公开了一种N‑酰基高丝氨酸内酯酶的突变体及其应用，通过理性设计和定点突变技术改造，获得相应的突变体，可大幅度提高AHL‑内酯酶AhlX的热稳定性和AHL水解活性，改造后突变体M41的Tm值提高了12.13℃，酶活性为野生型的17.67倍。将突变体M41应用于由E.carotovora感染引起的土豆、西葫芦、青椒、萝卜、白菜和茄子软腐病，结果显示突变体M41及E.carotovora共处理组的软腐病病斑面积均明显低于E.carotovora处理组，突变体M41可有效缓解由E.carotovora引起的多种植物软腐病。
📄 2023109774990
📂 C12N9_18
👤 浙江工业大学
📅 2023-08-04
本发明涉及一种对硝基苄基酯酶突变体、编码基因，及其在酶催化dl‑薄荷酯手性拆分制备l‑薄荷醇中的应用。本发明的有益效果主要体现在：①本发明酯酶突变体无需添加助溶剂，酶催化活性维持较高水平；②在无助溶剂体系下，突变体酶催化的立体选择性较野生型和F314E突变型显著提高，将该突变体酶通过大肠杆菌过量表达后用于催化反应，并以10～200g/L的dl‑乙酸薄荷酯为底物，进行水解拆分制备l‑薄荷醇，结果表明l‑乙酸薄荷酯底物转化率>93％，产物l‑薄荷醇的eep值>98％，表现出良好的工业应用性能。
📄 2022105809591
📂 C12N9_18
👤 浙江工业大学
📅 2022-05-25
本发明公开了一种对硝基苄基酯酶突变体及编码基因，以及含对硝基苄基酯酶突变体的基因工程菌，及其在酶催化dl‑薄荷酯的手性拆分制备l‑薄荷醇中的应用。所述对硝基苄基酯酶突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的对硝基苄基酯酶第109位、110位、193位、270位、273位、314位或362位的氨基酸残基进行组合突变获得。本发明的有益效果主要体现在：①本发明酯酶突变体无需添加助溶剂，酶催化活性维持较高水平；②在无助溶剂体系下，突变体酶催化的立体选择性较野生型显著提高。这些突变体酶通过大肠杆菌过量表达后用于催化反应，并以20～200g/L的dl‑乙酸薄荷酯为底物，进行水解拆分制备l‑薄荷醇，结果表明产物l‑薄荷醇的eep值>99％，底物转化率>95％，表现出良好的工业应用性能。
📄 2022115537108
📂 C12N9_18
👤 浙江工业大学
📅 2022-12-06
本发明涉及一种重组酯酶、编码基因、工程菌及在拆分R,S‑甲霜灵中的应用；所述酯酶的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示，相应的氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示；本发明提供的重组酯酶催化R,S‑甲霜灵的不对称水解，当底物浓度为10g/L时，37℃下反应6h，底物转化率为49.8％，产物甲霜灵酸(N‑(2,6‑二甲基苯基)‑N‑(2‑甲氧基乙酰)丙氨酸)的eep是99.3％，主要产物为R‑甲霜灵酸。R‑甲霜灵酸和甲醇可以在氯化亚砜的催化下合成R‑甲霜灵。
📄 2020108743953
📂 C12N9_18
👤 浙江工业大学
📅 2020-08-27
本发明公开了一种AHL‑内酯酶高热稳定性突变体及其在果树火疫病生物防治中的应用，突变体的突变位点为将氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示AHL‑内酯酶从氨基端到羧基端的第176位到第181位氨基酸序列进行突变，突变后的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，记为突变体A19‑9，或将从氨基端到羧基端的第176位到第184位氨基酸序列进行突变，突变后的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，记为突变体C13‑1，两种突变体的热稳定性相比野生型都得到了大幅提升。将两种突变体应用于制备生物致病菌抑制剂中，抑制Erwinia amylovora感染引起的苹果火疫病的效果比野生型更好，为E.amylovora感染引起的果树火疫病提供潜在的生物防治剂。
📄 2025106078296
📂 C12N9_18
👤 浙江工业大学
📅 2025-05-13
本发明公开了一种酯酶全细胞催化剂及其制备和应用，所述酯酶全细胞催化剂能够表达本发明公开的羧酸酯酶突变体，该羧酸酯酶突变体在SEQID NO.1所示的氨基酸序列上发生如下突变：第236位甘氨酸替换为缬氨酸，第417位精氨酸替换为苯丙氨酸，第545位苏氨酸替换为丙氨酸。本发明有效解决了现有技术中用于拆分菊酸甲酯的升温催化剂的催化活性低，以及产物耐受性差的问题。本发明的酯酶全细胞催化剂，显著提高了其选择性拆分菊酸甲酯制备右旋反式菊酸的活性，光学纯度可达99%以上。并且，本发明公开的羧酸酯酶突变体可在细胞上清中可溶性表达，可通过微生物发酵进行大规模生产，反应条件温和，操作过程简便，更适用于工业生产。
📄 202411401084X
📂 C12N9_18
👤 浙江工业大学
📅 2024-10-09
本发明公开了一种羧酯酶突变体及其在生产光学纯(R)‑3‑环己烯‑1‑甲酸中的应用，所述羧酯酶EstA1突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第70位、第128位、第133位、第227位、第248位、第249位、第297位、第301位、第326位或第329位进行单点突变或组合突变获得的。本发明提供了对外消旋(R,S)‑3‑环己烯‑1‑甲酸甲酯具有高催化活力，高立体选择性的羧酯酶EstA1突变体，所得突变体对映选择性拆分(R)‑3‑环已烯‑1‑甲酸工艺具有反应条件温和、对映体选择性高、反应时间短、催化剂用量少、反应体系简单、环境友好等特点。
📄 202510122936X
📂 C12N9_18
👤 浙江工业大学
📅 2025-01-26
本发明公开了柑橘果胶乙酰酯酶CsPAE及其编码基因和应用。本发明公开了柑橘感病蛋白CsPAE，如SEQ ID NO:1所示，及其编码框架核酸序列，如SEQ ID NO:2所示。此基因属于柑橘果胶乙酰酯酶家族成员。本发明还保护一种柑橘抗细菌性溃疡病的育种方法，包括如下步骤：使用RNAi的方式降低目的植物中CsPAE蛋白的含量和/或活性，从而提高目的柑橘属对柑橘溃疡病的抗病性。本发明对于柑橘的抗溃疡病育种具有重大的应用价值，这将为柑橘溃疡病抗病遗传育种奠定基础，大力促进柑橘抗溃疡病基因工程的发展和应用。
📄 2019113086484
📂 C12N9_18
👤 西南大学
📅 2019-12-18
一种利用共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法，它涉及涉及一种果胶酶的生产方法。本发明提供了一种利用共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法，该方法与现有技术相比具有工艺要求低、周期短、生产成本低的优势。产果胶酶的方法：一、将共养生孢菌属细菌HDYM‑13接种于魔芋粉培养基中；二、发酵培养、离心，取上清液即获得果胶酶。本发明魔芋粉培养基成分简单，只有魔芋粉、冰乙酸、硫酸铵和氯化钠，均为工业级原料，成本低廉。
📄 2018104468269
📂 C12N9_18
👤 黑龙江大学
📅 2018-05-11
柿子坊 · 知识产权运营
柿子坊知识产权运营平台