本发明提供了一种重组腈水合酶及其在耦合离子交换树脂制备烟酰胺中的应用，将重组腈水合酶基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体经超声波破碎后得到的上清液的浓缩液为催化剂，以3‑氰基吡啶为底物，加入离子交换树脂，以pH6‑9的磷酸缓冲溶液为反应介质构成反应体系，在20‑30℃、100‑1000rpm条件下进行水合反应，反应完全后，将反应液分离纯化，获得产物烟酰胺。本发明重组腈水合酶耦合离子交换树脂具有条件温和、效率高，高度的化学选择性、区域选择性选择性等优点，而且生物催化过程具有无毒、无污染和能耗低等特点，是一种环境友好的合成方法，吸附了95％以上的烟酸杂质，得到了纯度99.99％以上的烟酰胺产品。
📄 2021116332577
📂 C12N9_88
👤 浙江工业大学
📅 2021-12-29
本发明公开了L‑天冬氨酸‑α‑脱羧酶突变体及其应用，提供的两种L‑天冬氨酸‑α‑脱羧酶突变体，分别通过将桃蚜来源的L‑天冬氨酸‑α‑脱羧酶的氨基端前4位或前39位氨基酸残基切除获得。相比野生型的L‑天冬氨酸‑α‑脱羧酶，两种突变体的可溶性蛋白表达分别增加了62%和56%，催化相对活性分别提高了64%和162%。可溶表达和活性提高的突变体用于β‑丙氨酸的合成时，可大幅提高β‑丙氨酸的生产效率，具有很高的应用价值。
📄 2022106380600
📂 C12N9_88
👤 浙江工业大学
📅 2022-06-08
本发明公开了一种脂肪酸光脱羧酶突变体及其在L‑草铵膦合成中的应用，该脂肪酸光脱羧酶突变体为将SEQ ID No.2所示氨基酸第402位甘氨酸突变为苯丙氨酸；或者，第402位突变的同时第370位苏氨酸突变为精氨酸；或者，第402位突变、第370位突变的同时第513位丝氨酸突变为甘氨酸等。本发明利用定点饱和突变技术脂肪酸光脱羧酶基因进行突变，发现第370位、第371位、第402位、第513位、第514位是影响酶活和立体选择性的关键位点，获得酶活和ee值远高于母本脂肪酸光脱羧酶的突变体，最高的转化率为50％，产物ee值为96％。
📄 2020108747564
📂 C12N9_88
👤 浙江工业大学
📅 2020-08-27
本发明公开了一种本发明涉及一种腈水合酶突变体，具体涉及一种腈水合酶赖氨酸突变体HBA‑K2H2及其编码基因，含有该突变体编码基因的质粒及重组菌，以及该腈水合酶赖氨酸突变体HBA‑K2H2在催化有机腈化合物制备酰胺化合物中的应用。所述突变体HBA‑K2H2的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其最适pH为9.0，最适温度为35℃。与野生酶HBA相比，突变腈水合酶HBA‑K2H2的碱性活力得到了改良，可应用于生物催化生产丙烯酰胺、烟酰胺及其它高附加值的酰胺类化合物，化工纤维表面改性和碱性污水处理等生物技术领域。
📄 2021103968404
📂 C12N9_88
👤 浙江工业大学
📅 2021-04-13
本发明涉及一种来源于放射形土壤杆菌的卤醇脱卤酶突变体，以及其在制备(S)-环氧氯丙烷中的应用。所述突变的位点为下列之一：(1)第81位；(2)第86位；(3)第94位。本发明通过卤醇脱卤酶进行改造获得多株突变株，针对1,3-二氯-2-丙醇转化制备(S)-ECH具有极高的立体选择性。在磷酸盐缓冲体系中，能够催化制备光学纯度(e.e.值)大于99％的(S)-ECH。该技术具有酶立体选择性优异，反应体系简单，操作过程易于控制，生产成本低，产品光学纯度高等突出优势，具有良好的工业应用价值。
📄 2018115853429
📂 C12N9_88
👤 浙江工业大学
📅 2018-12-24
本发明公开了一种本发明涉及一种腈水合酶突变体，具体涉及一种腈水合酶赖氨酸突变体HBA‑K2H1及其编码基因，含有该突变体编码基因的质粒及重组菌，以及该腈水合酶赖氨酸突变体HBA‑K2H1在催化有机腈化合物制备酰胺化合物中的应用。所述突变体HBA‑K2H1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其最适pH为8.5，最适温度为35℃。与野生酶HBA相比，突变腈水合酶HBA‑K2H1的碱性活力得到了改良，可应用于生物催化生产丙烯酰胺、烟酰胺及其它高附加值的酰胺类化合物，化工纤维表面改性和碱性污水处理等生物技术领域。
📄 2021103979038
📂 C12N9_88
👤 浙江工业大学
📅 2021-04-14
本发明公开了一种卤醇脱卤酶突变体、工程菌及其应用，其特征在于所述突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第105位、第134位、第136位、第137位、第178位或第186位进行单突变或多突变获得。本发明利用水‑有机双相缓冲溶液体系(乙酸乙酯：磷酸钠缓冲液＝6:4)使得卤醇脱卤酶突变体的产物(S)‑环氧氯丙烷的e.e.值超过99％，湿细胞酶活分别从23.56U/mL提高至100‑600U/mL，产率达15.9％‑80.2％。
📄 2022100076715
📂 C12N9_88
👤 浙江工业大学
📅 2020-05-22
本发明公开了一种卤醇脱卤酶突变体及其在合成手性环氧氯丙烷中的应用，其特征在于所述突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第105位、第134位、第136位、第137位、第178位或第186位进行单突变或多突变获得。本发明利用水-有机双相缓冲溶液体系(乙酸乙酯：磷酸钠缓冲液＝6:4)使得卤醇脱卤酶突变体的产物(S)-环氧氯丙烷的e.e.值超过99％，湿细胞酶活分别从23.56U/mL提高至100-600U/mL，产率达15.9％-80.2％。
📄 2020104413935
📂 C12N9_88
👤 浙江工业大学
📅 2020-05-22
本发明公开了一种酪氨酸酚裂解酶突变体及其合成酪氨酸衍生物的应用，所述突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第18位或第417位进行单突变或多突变获得的。本发明所提供的酪氨酸酚裂解酶突变体与野生型相比，具有更优良的酶活、更优良的催化性能。TPL突变体合成左旋多巴累积浓度高达160g/L以上，合成L‑酪氨酸累积浓度高达80g/L以上，合成3,4,5‑TOPA累积浓度高达16.4g/L以上，合成3‑氟‑L‑酪氨酸累积浓度高达33.1g/L以上，合成2‑氟‑L‑酪氨酸累积浓度高达20.5g/L以上，光学纯度均大于99.9％。
📄 2024112747809
📂 C12N9_88
👤 浙江工业大学
📅 2024-09-12
本发明公开了一种本发明涉及一种腈水合酶突变体，具体涉及一种腈水合酶赖氨酸突变体HBA‑K2H2R及其编码基因，含有该突变体编码基因的质粒及重组菌，以及该腈水合酶赖氨酸突变体HBA‑K2H2R在催化有机腈化合物制备酰胺化合物中的应用。所述突变体HBA‑K2H2R的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其最适pH为9.0，最适温度为35℃。与野生酶HBA相比，突变腈水合酶HBA‑K2H2R的碱性活力得到了改良，可应用于生物催化生产丙烯酰胺、烟酰胺及其它高附加值的酰胺类化合物，化工纤维表面改性和碱性污水处理等生物技术领域。
📄 2021103968476
📂 C12N9_88
👤 浙江工业大学
📅 2021-04-13
本发明涉及一种来源于放射农杆菌的卤醇脱卤酶突变体，以及其在制备(S)‑环氧氯丙烷中的应用。所述突变的位点为第85位。通过卤醇脱卤酶进行改造获得突变体，对手性环氧氯丙烷的不对称合成具有高立体选择性与活性，在磷酸盐缓冲体系中，以1,3‑二氯‑2‑丙醇为底物，能够获得光学纯度(e.e.值)大于99％的(S)‑ECH，产率达87％以上，具有极高的应用价值。
📄 2018115853537
📂 C12N9_88
👤 浙江工业大学
📅 2018-12-24
本发明公开了一种固定化碳酸酐酶及其制备与在捕集烟气中CO2的应用，所述固定化碳酸酐酶按如下方法制备：将六水合硝酸锌水溶液滴加至2-甲基咪唑水溶液中，在30-40℃下搅拌5-6min，再加入碳酸酐酶溶液，继续搅拌20-25min，反应结束后，离心，沉淀用去离子水洗涤，得到固定化碳酸酐酶；本发明利用固定化碳酸酐酶颗粒强化有机胺溶液吸收-解吸燃煤电厂烟气中CO2，在同等条件下提高了CO2吸收速率和吸收容量，吸收速率可达到传统MEA工艺的80-90％，吸收容量提高了40-60％，显著地提升了经济效益和社会效益。
📄 2018113853759
📂 C12N9_88
👤 浙江工业大学
📅 2018-11-20
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