本发明涉及一种转氨酶UPTA，所述转氨酶UPTA的氨基酸序列为SEQ ID NO.1。在合适温度及pH下，本发明的转氨酶UPTA对HFB1的降解率为100％；本发明转氨酶UPTA性质优良，该酶可以应用于农业、饲料和食品等工业，减少伏马毒素FB1对动物及人类健康的危害。
📄 2020110008607
📂 C12N9_10
👤 天津科技大学
📅 2020-09-22
本发明涉及一种α-转氨酶突变体及其在不对称合成L-草铵膦中的应用。所述突变体是将SEQ ID:1所示的氨基酸序列的第52、71、81、153、168、324、341和361位中的一个或者多个进行单位点突变或多位点突变获得的。本发明实现高转化率α-转氨酶突变体基因的高效表达，酶活最高为808.1U/mg。本发明中所述α-转氨酶突变体的最适反应温度最高达到67℃，在该温度下催化600mM草铵膦前体酮不对称合成L-草铵膦中，转化率高达100％，是文献报道的最高水平。该CkTA突变体解决了现有α-TA酶活低、底物耐受性差、转化率低的技术难题，具有较好应用前景。
📄 2019100321715
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2019-01-14
本发明公开了一种转氨酶突变体以及其编码基因，以及其在微生物催化2‑羰基‑4‑[羟基(甲基)膦酰基]丁酸为底物不对称合成L‑草铵膦中的应用。所述转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID:1所示，其突变体是将SEQ ID:1所示的氨基酸序列的第138和141位中的一个进行单位点突变或组合突变获得的。本发明实现了高转化率转氨酶活力突变体基因的高效表达，酶活最高可达3827U/g。本发明转氨酶突变体在温度40℃，以pH 8.0缓冲液为反应介质进行生物催化反应获得L‑草铵膦，收率高达99％，产物e.e.值达到99％，具有较好应用前景。
📄 2021105603363
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2021-05-21
本发明公开了一种O‑琥珀酰‑L‑高丝氨酸巯基转移酶突变体及其应用，所述突变体是将SEQ ID NO.1所示的O‑琥珀酰‑L‑高丝氨酸巯基转移酶氨基酸序列的第59位、第119位进行单突变或多突变获得的。本发明通过半理性设计，定点突变技术改造MetZ，最终获得了在不损失酶活力的情况下对高浓度甲硫醇钠环境下耐受性提高的突变体。本发明的突变体对甲硫醇钠的耐受性大幅提高，由突变前的5％提高到15％，具有很大工业价值。本发明突变体对底物的转化率显著提高，有利于生产应用。
📄 2024110578276
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2024-08-02
本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其应用，所述ω‑转氨酶突变体是将SEQ ID NO.1所示野生型ω‑转氨酶氨基酸序列的第54位色氨酸、第411位精氨酸经单点或多点突变所得。相比野生型ω‑转氨酶，本发明的ω‑转氨酶突变体催化前手性酮生成手性胺的催化效率高，其中突变体R411A催化4‑(三氟甲基)苯乙酮的转化产率为野生型ω‑转氨酶的2.39倍，所得产物对映体过量值(enantiomeric excess,ee)>99.9％。
📄 2022116105949
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2022-12-14
发明涉及基因工程领域，具体涉及谷氨酸棒状杆菌来源的酮泛解酸羟甲基转移酶突变体及其编码基因及其在制备酮泛解酸和D‑泛酸中的应用。本发明通过借助计算机模拟技术，对底物通道及活性口袋周围关键氨基酸位点进行预测和突变，得到了一系列突变体。所述对酮泛解酸羟甲基转移酶突变体是是将SEQ ID NO:1所示氨基酸序列第18位、第20位、第21位、第24位、第25位、第26位、第27位、第49位进行定点突变获得的。最终得到的酮泛解酸羟甲基转移酶突变体中有酶活显著改变的突变体，该突变体相比于野生型酶在催化α‑酮异戊酸产生酮泛解酸时催化活力和底物耐受性大大提高。
📄 2021108396651
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2021-07-23
本发明涉及一种酮泛解酸羟甲基转移酶突变体、编码基因，含有编码基因的载体、基因工程菌及应用。所述突变体是利用基因工程技术对谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum ATCC 13032)来源的酮泛解酸羟甲基转移酶KPHMT基因进行定点突变，后导入表达宿主E.coli BL21(DE3)中得到。本发明的有益效果主要体现在：本发明得到了一系列对酮泛解酸羟甲基转移酶酶活有明显改变的酮泛解酸羟甲基转移酶突变体，相较野生型酮泛解酸羟甲基转移酶，本发明构建的酮泛解酸羟甲基转移酶突变体通过与野生型酶比较，酶活有所提高，优于现有报道的酮泛解酸羟甲基转移酶，可有效提高终产物D‑泛酸的产量，降低生产成本。
📄 2022107274219
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2022-06-24
本发明公开了一种源自放线菌的转氨酶、突变体、重组菌及应用本发明提供的R-3-氨基丁醇的生物制备方法，初始原料为丁酮醇，价格便宜。所需的重组转氨酶可通过构建大肠杆菌基因工程菌，然后通过发酵大量制备，相对易得和廉价。所述反应为“一锅煮”式，底物和酶加入后开始反应，直接得到终产物R-3-氨基丁醇，工业成本低。本发明所提供的放线菌转氨酶突变体与野生型相比较，具有更优良的催化活性。在最优体系下，对100mM底物的转化率达90％，ee值达到99.9％；对500mM底物的转化率达到78％，ee值达到99.9％，与野生型相比较，对底物转化率分别提高了12％-25％。
📄 2018107028788
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2018-06-30
本发明公开了一种糖基转移酶突变体及其应用，所述突变体是将SEQ ID NO.4所示氨基酸序列第58位、第181位或第371位氨基酸进行单突变或多突变，或者将SEQ ID NO.6所示氨基酸序列第54位、第152位、第241位或第272位氨基酸进行单突变或多突变获得的。本发明利用同源建模和序列同源性分析对糖基转移酶进行理性改造，筛选得到酶活明显提高的糖基化转移酶突变体。与野生型相比，突变体UGTM1‑3、UGTM2‑4的相对酶活较改造前，分别提高了2.88倍和3.60倍，具有较大的工业应用潜力。
📄 2024116164556
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2024-11-13
本发明公开了一种转氨酶、突变体及其生产L‑草铵膦的应用，所述突变体是将SEQ ID NO：2所示氨基酸第62位的异亮氨酸取代为缬氨酸、第74位的丝氨酸取代为苏氨酸、第93位的甲硫氨酸取代为异亮氨酸、第167位的酪氨酸取代为苯丙氨酸、第220位的丙氨酸取代为脯氨酸、第282位的精氨酸取代为赖氨酸、第353位的丙氨酸取代为丝氨酸、第355的异亮氨酸取代为缬氨酸。转氨酶以4‑(甲基羟基磷酰基)‑2‑羰基‑丁酸为底物制备L‑草铵膦，产物ee>99.9％，4h底物转化率为56.31％。转氨酶突变体产物ee>99.9％，4h底物转化率为95.42％。
📄 2018105409802
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2018-05-30
本发明涉及一种重组R‑ω‑转氨酶及突变体，以及其在不对称合成西他列汀中的应用。本发明筛选新型R‑ω‑转氨酶，并与现有的高效转氨酶重组，获得的重组体的氨基酸序列如SEQ ID:15所示，其突变体是将SEQ ID:15所示的氨基酸序列的第71、135、或292中的一个或者多个进行单位点突变或多位点突变获得的，最佳的R‑ω‑转氨酶突变株的氨基酸序列如SEQ ID:17所示，对应的核苷酸序列如SEQ ID:18所示。本发明提供了具有更高活性(582.4U/g)和立体选择性(e.e.值99.9％)的R‑ω‑TA突变体，可催化500mM底物转化为西他列汀，转化率高达99％，对于提升西他列汀生物催化制备技术具有重要意义。
📄 2019113093505
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2019-12-18
本发明涉及一种烟酸磷酸核糖基转移酶突变体以及编码基因，以及其多酶偶联法生物合成L‑草铵膦、D‑氨基酸、L‑叔亮氨酸或L‑氨基丁酸中的应用。本发明的有益效果主要体现在：(1)本发明烟酸磷酸核糖基转移酶突变体，提高胞内NAD水平，为辅酶依赖型多酶催化反应带来高效、低成本且环境友好的生产方式，不需要额外添加辅酶；(2)本发明烟酸磷酸核糖基转移酶突变体具有更好的催化效率，以中间产物PPO为底物进行催化反应时，转化率远高于原始酶，L‑草铵膦产率也大幅提升；(3)本发明能够不外源添加辅酶直接利用PPO制备生产L‑草铵膦，无需昂贵的拆分试剂，也无需合成草铵膦衍生物，更无需对D‑草铵膦进行分离、再消旋、再拆分等步骤。
📄 2022117412037
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2022-12-31
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