本发明公开了一种反式茴香脑加氧酶的突变体和突变株,所述反式茴香脑加氧酶的突变体与野生型反式茴香脑加氧酶氨基酸序列相比,其185位氨基酸Glu变为Asp,所述反式茴香脑加氧酶的突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO 1所示。合成对茴香醛、藜芦醛、洋茉莉醛、香兰素的转化速率分别为原始菌株的1.91、2.08、1.33、1.92倍,5F4在生物法合成芳香醛香料中,展现了良好的应用潜力,同时5F4的催化时pH的适应性更广泛,更适合用工业生产应用,能够降低成本,提高生产效率。
📄 2018106632215
📂 C12N9_02
👤 江南大学
📅 2018-06-25
本发明公开了反式茴香脑加氧酶突变体和突变株。所述反式茴香脑加氧酶突变体与野生型反式茴香脑加氧酶氨基酸序列相比,其75位氨基酸Thr变为Met,331位氨基酸Phe变为Leu,所述反式茴香脑加氧酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO 1所示。其合成对茴香醛、藜芦醛、洋茉莉醛、香兰素的转化速率分别为原始菌株的1.17、1.39、1.34、1.51倍,在生物法合成芳香醛香料中,展现了良好的应用潜力。
📄 2018106632107
📂 C12N9_02
👤 江南大学
📅 2018-06-25
本发明公开了一种反式茴香脑加氧酶突变体及其突变株,其中,所述反式茴香脑加氧酶突变体与野生型反式茴香脑加氧酶氨基酸序列相比,319位氨基酸脯氨酸变为丝氨酸,所述反式茴香脑加氧酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO 1所示。本发明通过易错PCR的方式,随机突变了反式茴香脑加氧酶,并导入到E.Coli BL21(DE3)中,经过筛选后获得突变重组菌4C7,其合成对茴香醛、藜芦醛的转化速率分别为原始野生型菌株的2.05、2.38倍,更适合用工业生产应用,能够降低成本,显著提高生产效率。
📄 201810662130X
📂 C12N9_02
👤 江南大学
📅 2018-06-25
本发明公开了一种草铵膦脱氢酶突变体及其应用,该草铵膦脱氢酶突变体由SEQ ID No.2所示氨基酸的第90位、第91位、第376位进行单突变或多突变获得;其中,第90位的赖氨酸突变为丝氨酸;第91位甘氨酸突变为丝氨酸或脯氨酸;第376位的丝氨酸突变为精氨酸。本发明利用定点饱和突变技术对SEQ ID No.1所示的草铵膦脱氢酶基因进行突变,发现第90位、第91位、第376位是影响酶活的关键位点,获得比酶活远高于母本草铵膦脱氢酶的突变体,其中,突变体lvPDH‑K90S‑G91P‑S376R的比酶活较母本草铵膦脱氢酶提升了8.4倍,具有工业应用前景。
📄 2018115856747
📂 C12N9_02
👤 浙江工业大学
📅 2018-12-25
本发明公开了一种烯还原酶突变体、工程菌及其制备(2R,5R)‑二氢香芹酮的应用,以烯还原酶突变体纯酶为催化剂,以(5R)‑香芹酮为底物,以NAD(P)+为辅因子,以醇脱氢酶或葡萄糖脱氢酶为辅酶,以异丙醇或葡萄糖为辅助底物,以pH 8.0‑10.0的缓冲液为反应介质构成反应体系,在30‑40℃,180‑250rpm转速的摇床中反应完全后,反应液分离纯化,获得(2R,5R)‑二氢香芹酮。本发明突变烯还原酶GsOYE‑R13不对称还原(5R)‑香芹酮生产(2R,5R)‑二氢香芹酮的产率提高至99%以上,dep值提高至99%以上(2R,5R)。
📄 2022102335377
📂 C12N9_02
👤 浙江工业大学
📅 2022-03-10
本发明公开了一种3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体、编码基因、载体及应用,属于酶工程技术领域。本发明的3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体,由氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体的第214位和/或第499位经定点突变获得。本发明通过多序列氨基酸比对,进行定点突变,提高了3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶的催化效率,进一步提高了3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶产量。本发明构建的3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶的重组大肠杆菌可将3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶酶活较出发菌株提高1.5倍,改造后的基因工程菌产酶能力显著提高,更适合工业应用,可降低生产成本,提高生产效率。
📄 2021112636022
📂 C12N9_02
👤 浙江工业大学
📅 2021-10-28
本发明公开了一种烯烃还原酶、编码基因、载体、工程菌及其应用,所述烯烃还原酶SeER突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第38位、第117位、第248位、第293位点、第373位点进行单点或多位点定点突变或者定点饱和突变获得的。本发明提供一系列新的能够高效立体互补还原烯烃化合物制备手性化合物的烯烃还原酶SeER突变体,成功通过化学‑酶偶联方法合成手性GABA衍生物类药物,如菲尼布特、巴氯芬、托利布特、普瑞巴林等,与现有方法相比,本发明所述菌株可以灵活调控产物的构型,且立体选择性和转化率高。
📄 2024116833273
📂 C12N9_02
👤 浙江工业大学
📅 2024-11-22
本发明公开了一种姜黄素还原酶CfcurA及其编码基因,以及其在微生物催化制备四氢姜黄素中的应用。所述姜黄素还原酶CfcurA氨基酸序列如SEQ IDNO.2所示,其编码基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1。本发明的有益效果主要体现在:本发明提供了一种姜黄素还原酶CfcurA及其编码基因,可用于酶法催化生产四氢姜黄素,该方法转化率较高,选择性较好,可在24h内催化20g/L的姜黄素生成16.4g/L的四氢姜黄素,具有较好应用前景。
📄 2022115573176
📂 C12N9_02
👤 浙江工业大学
📅 2022-12-06
本发明公开了一种重组细胞色素P450酶,重组细胞色素P450酶所编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还同时提供了由上述重组细胞色素P450的编码基因构建的重组载体,为质粒pET28b(+)‑细胞色素P450。本发明还同时提供了上述重组细胞色素P450的用途:降解二氯甲烷、1,2‑二氯乙烷,具有特异性和广谱性。
📄 2020110482491
📂 C12N9_02
👤 浙江工业大学
📅 2020-09-29
本发明涉及一种来源于胡椒的2‑链烯还原酶及其编码基因,以及该2‑链烯还原酶在微生物催化制备四氢胡椒碱中的应用。所述胡椒2‑链烯还原酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,编码基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供了一种可催化制备四氢胡椒的2‑链烯还原酶及其编码基因,利用该酶以胡椒碱为反应底物,可实现四氢胡椒碱的高效制备。
📄 2022108630598
📂 C12N9_02
👤 浙江工业大学
📅 2022-07-21
本发明公开了一种重组醛酮还原酶突变体、基因、载体、工程菌及其在制备6‑氰基‑(3R,5R)‑二羟基己酸叔丁酯中的应用,所述突变体是分别将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第297位的色氨酸突变为组氨酸、或第296位的酪氨酸突变为色氨酸且第297位的色氨酸突变为组氨酸获得的。本发明醛酮还原酶突变体W297H和Y296W/W297H均对6‑氰基‑(3R,5R)‑二羟基己酸叔丁酯的立体选择性和活性显著提高,转化率达到99%,产物达到光学纯(d.e.值>99.5%)。
📄 201710282633X
📂 C12N9_02
👤 浙江工业大学
📅 2017-04-26
本发明公开了一种烯醇还原酶突变体及其在制备(R)‑香茅醛中的应用,本发明利用突变体OYE3‑Mut为生物催化剂,以NADP+为辅酶,以葡萄糖脱氢酶和D‑葡萄糖驱动辅酶循环,成功构建双酶级联催化不对称合成光学纯(R)‑香茅醛的反应体系。OYE3‑Mut不能利用(Z)‑柠檬醛为底物。在双酶催化体系中,20mM(E)‑柠檬醛和(E/Z)‑柠檬醛分别经OYE3‑Mut酶法催化其不对称还原反应11h后,与烯醇还原酶OYE3相比,(E)‑柠檬醛催化产物e.e.值从63.4%(R)提高到了>99%(R),(E/Z)‑柠檬醛催化产物e.e.值从23.6%(R)提高到了>99%(R)。
📄 2020101631317
📂 C12N9_02
👤 浙江工业大学
📅 2020-03-10