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本发明公开了重组表达具有明胶酶活性p37k蛋白酶的方法及其提高p37k蛋白性能的方法，本发明通过Bac‑to‑Bac杆状病毒表达系统表达得到约40kD的重组蛋白，然后激活后获得分子量约为25kDa的p37k蛋白酶，25kDa的p37k蛋白酶具有明胶酶活性，但是重组表达的p37k蛋白酶的对热敏感，研究发现在p37k蛋白酶加入中肠提取物和金属离子能够提高重组表达的p37k蛋白酶的热稳定性，并且，加入E64能够提高重组表达的p37k明胶水解活性。因此，中肠提取物和金属离子能够作为p37k蛋白酶的热稳定性保护剂，E64能够作为p37k明胶水解活性的增强剂，为进一步拓展p37k蛋白酶条件提供了基础。

一种中介蝮蛇毒纤溶酶，其基因为Gisp6，具有序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，具有序列表中SEQ ID No.2所示的氨基酸序列；其制备方法由中介蝮蛇毒纤溶酶的纯化方法、纯度鉴定以及质谱分析、中介蝮蛇毒纤溶酶Gisp6基因的克隆三个步骤组成；中介蝮蛇毒纤溶酶在HEK293T细胞建立稳定表达细胞株中的用途，中介蝮蛇毒纤溶酶在溶解血栓药物中的用途。由于采取了最佳的盐浓度，减少了组分与填料的非特异性吸附；采用了最佳pH值，使得峰之间不重叠，排除了杂质、提高了产物的纯度。