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发明专利
已授权
一种基于依赖解旋酶DNA恒温扩增技术检测microRNA的方法
📄 申请号:CN201710325050.0
📄 发布日:2026/07/23
著录项目信息
申请日
2017-05-10
公开号
CN107130024B
公开日
2020-03-27
申请人
山东师范大学
法律状态
已下证
专利类型
发明
主分类号
C12Q1_6844
IPC 分类号
C12Q1_6844
技术画像
所属领域
microRNA
核酸检测
分子诊断
恒温扩增技术
microRNA
应用场景
医学诊断, 疾病标志物检测, 液体活检, 生物医学研究, 临床检验
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摘要
本发明公开了一种基于依赖解旋酶DNA恒温扩增技术检测microRNA的方法,步骤如下:(1)提取样品中的总RNA;(2)向提取的总RNA中加入单链DNA探针和过量的核酸外切酶I,在反应缓冲液中进行孵育,实现目标microRNA与单链DNA探针的特异性结合,利用过量的核酸外切酶I将多余的单链DNA探针消除;(3)向步骤(2)的反应体系中加入上游引物、下游引物、单链结合蛋白和解旋酶,对目标microRNA进行扩增反应,通过荧光信号检测目标microRNA的表达。本发明借助核酸外切酶I的消化以降低背景、利用解旋酶辅助的恒温扩增(HDA)反应以放大信号,实现了对microRNA的快速和高灵敏检测。
权利要求书 (12项)
说明书
附图
……
……
图1
图2
图3
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