本发明涉及一种基于三重放大技术均相非标检测端粒酶活性的方法，其是通过将端粒酶延长产物与辅助DNA结合释放出引发DNA，引发DNA能够引发链替代反应，形成发夹H1:H2复合物，在复合物的两个末端能够各自形成G‑四链体，N‑甲基卟啉二丙酸Ⅸ(NMM)自身荧光信号很弱，嵌插G‑四链体后荧光信号显著增强，通过检测NMM荧光信号的变化，可灵敏的检测端粒酶活性，本发明充分利用链替代反应，无需酶辅助就能够实现信号放大，同时巧妙利用了G‑四链体的形成，构建了无需标记，就能灵敏的检测端粒酶活性的方法，为肿瘤疾病的诊断，治疗，以及关于疾病机理研究提供了新思路，在基于端粒酶的癌症治疗诊断方面有很重要的意义。
📄 2015106385799
📂 C12Q1_6844
👤 陕西师范大学
📅 2015-09-30
本发明公开了一种基于依赖解旋酶DNA恒温扩增技术检测microRNA的方法，步骤如下：(1)提取样品中的总RNA；(2)向提取的总RNA中加入单链DNA探针和过量的核酸外切酶I，在反应缓冲液中进行孵育，实现目标microRNA与单链DNA探针的特异性结合，利用过量的核酸外切酶I将多余的单链DNA探针消除；(3)向步骤(2)的反应体系中加入上游引物、下游引物、单链结合蛋白和解旋酶，对目标microRNA进行扩增反应，通过荧光信号检测目标microRNA的表达。本发明借助核酸外切酶I的消化以降低背景、利用解旋酶辅助的恒温扩增(HDA)反应以放大信号，实现了对microRNA的快速和高灵敏检测。
📄 2017103250500
📂 C12Q1_6844
👤 山东师范大学
📅 2017-05-10
本发明公开了一种可常温运输的环介导等温扩增试剂、制备方法及应用，该试剂包括Bst DNA Polymerase、dNTP、引物混合物、指示剂、保护剂和气溶胶污染预防剂；将上述组分混合，在‑70～‑80℃下冷冻干燥8～16h，即可得环介导等温扩增试剂。本发明制备了一种用于核酸检测的环介导等温扩增试剂，能够常温运输保存，运输方便，稳定性好；同时解决了气溶胶污染限制了LAMP技术推广的问题，大大降低了LAMP技术的应用和推广难度。试剂中Bst DNA Polymerase活性为150％，可常温保存一年以上，使用时仅需加入缓冲液即可，操作简单，DNA聚合酶活性高，检测灵敏度无损失，保护剂干扰小，成本低廉。
📄 2018115683273
📂 C12Q1_6844
👤 西安海泰克生物技术有限公司
📅 2018-12-21
本发明提供了一种基于T5外切酶的双轮信号扩增目视检测层出镰刀菌的方法，属于生物检测技术领域，所述方法包括：基因组DNA的提取、RPA反应、连接反应、外切反应、RCA反应及氧化还原反应。本发明基于T5外切酶和T4DNA连接酶建立了一种新的目视检测F.proliferatum的方法，通过将RPA产物一条链的两端连接成环从而将RPA和RCA偶联起来，目标序列经两轮扩增，检测限达到0.05pg，具有高灵敏度，本发明的方法具有无需标记，操作简单，不需要复杂的仪器，适用性高的优点。
📄 2019107697527
📂 C12Q1_6844
👤 临沂大学
📅 2019-08-20
本发明公开了一种等温快速扩增检测食品中致病菌的方法，属于食品安全检测技术领域。本发明通过多重序列对比确定了针对各菌的检测靶核酸，设计了特异性的分子信标探针和引物，以各菌株基因组DNA为模板，建立了实时荧光CSDPR，进行等温核酸扩增，并且验证了CSDPR方法的特异性、灵敏度和最低检测限，还通过实际样品的检测确定了本发明建立的方法具有实际可行性。本发明方法对于食品中的多种致病菌的检测具有通用性，包括金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、肠出血性大肠埃希氏菌、志贺氏菌等，仅需替换掉分子信标探针中的特定部分，即可实现对不同致病菌的有效检测，而且检测灵敏度、特异性高，原理与操作简单，样品前处理简单。
📄 2017104159218
📂 C12Q1_6844
👤 江南大学
📅 2017-06-06
本专利公开了一种基于DNA网状结构灵敏检测miRNA的方法，涉及生物传感领域。通过设计结构可切换的哑铃型探针，提高了目标识别的特异性，同时又使得滚环扩增产物具有串联重复茎环结构的特点；滚环扩增产物与修饰DNA-AuNPs杂交形成DNA网状结构，使得AuNPs发生聚集，利用动态光散射技术对AuNPs尺寸进行测量，从而实现miRNA的检测。本发明灵敏度高、特异性好。
📄 2020103169394
📂 C12Q1_6844
👤 济南大学
📅 2020-04-21
本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及miRNA特异识别的S及其构象改变和滚环等温循环放大检测miRNA的生物传感器，为了解决以上现有技术中检测miRNA的方法特异性和灵敏度都比较低、成本高的问题。一种检测miRNA的生物传感器，在电极上依次修饰有S1层、RCA产物层。制备方法：对电极进行预处理；将S1层修饰到电极表面；将RCA产物层修饰到电极表面。利用了miRNA的特异性识别实现了对目标物的高特异性检测；利用DNAzyme和滚环等温放大技术，实现了目标物信号的三步放大。
📄 202010273779X
📂 C12Q1_6844
👤 济南大学
📅 2020-04-09
本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及基于滚环扩增技术和内切酶反馈放大方法检测三磷酸腺苷的荧光生物传感器，包括：两段适配体DNA序列、线性挂锁探针、连接探针、AP探针、T4 DNA连接酶缓冲液、核酸外切酶Ⅰ、核酸外切酶Ⅲ、PBS缓冲液、dNTP、phi29 DNA聚合酶、核酸内切酶IV；所述的荧光生物传感器的制备方法：（1）构建环形模板，制备复合探针；（2）复合探针与内切酶、目标物结合，实现信号放大。该探针可实现高特异性及超灵敏性检测；且反应温和、检测快、重复性好。
📄 2018115897713
📂 C12Q1_6844
👤 济南大学
📅 2018-12-25
本发明公开了一种环介导等温扩增法检测苜蓿根腐病菌的引物及方法，所述引物包括一组外引物F3/B3和一组内引物FIP/BIP，所述引物的碱基序列如SEQ ID NO.1‑4所示。所述方法包括：提取待测样品DNA；以DNA为模板，采用所述的引物进行LAMP等温扩增；在LAMP扩增产物中加入荧光染料进行显色，观察LAMP扩增产物的颜色，对产物进行分析，判断是否存在苜蓿根腐病菌。所述的引物及其快速LAMP检测方法可在生产实践中对苜蓿根腐病菌进行快速、灵敏、准确的检测，同时可用于田间病害的早期诊断和病菌的监测和鉴定，并且操作简便易行，为苜蓿根腐病的防治提供可靠的技术和理论依据。
📄 2016110770191
📂 C12Q1_6844
👤 福建省农业科学院植物保护研究所
📅 2016-11-30
本发明公开了半胱天冬酶生物传感器及应用、半胱天冬酶活性的检测方法，半胱天冬酶生物传感器，包括磁珠、检测探针、环形模板、DNA聚合酶、二级引物；磁珠表面包覆链霉亲和素；检测探针包括连接的肽底物结构域和DNA引物结构域，肽底物结构域为氨基酸序列，DNA引物结构域为单链DNA序列；肽底物结构域含有特异位点，特异位点能够被半胱天冬酶识别并切割，特异位点与连接位点距离n个氨基酸，连接位点是肽底物结构域和DNA引物结构域的连接处，肽底物结构域连接生物素连接，特异位点位于生物素与连接位点之间，n为小于10的自然数；DNA引物结构域能够与环形模板、DNA聚合酶、二级引物配合进行分支滚环扩增反应。
📄 2020101694744
📂 C12Q1_6844
👤 山东师范大学
📅 2020-03-12
本发明属于DNA糖基化酶检测技术领域，具体涉及一种同时检测多种DNA糖基化酶的荧光化学传感器、其检测方法及应用。提供同时检测多种DNA糖基化酶的方法、提高检测精度有利于降低分析检测成本，提高临床应用实用性。本发明提供了一种同时检测人类烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(hAAG)和尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)的方法，它将单分子检测与滚环扩增驱动的编码不同的荧光分子结合起来，可用于在单细胞水平上同时检测癌细胞中的多种DNA糖基化酶，并能区分正常细胞与癌细胞。它可以进一步用于酶动力学参数的分析和DNA糖基化酶抑制剂的筛选，在生物医学研究、临床诊断和药物开发中具有巨大的潜力。
📄 202010067224X
📂 C12Q1_6844
👤 山东师范大学
📅 2020-01-20
本发明公开了一种用于检测胸腺嘧啶DNA糖基化酶活性的方法，通过由胸腺嘧啶DNA糖基化酶引发、酶修复辅助的循环滚环指数扩增和核酸内切酶Ⅳ催化介导的循环切割实现实时检测胸腺嘧啶DNA糖基化酶活性的荧光方法；由于尿嘧啶切除辅助的循环滚环扩增和基于核酸内切酶Ⅳ的循环切割效率都很高，且尿嘧啶介导的指数扩增能极大地抑制非特异性扩增，因此该方法的检测灵敏度很高，经检测，所述方法对胸腺嘧啶DNA糖基化酶的检测下限可达5.6×10‑7U/μL；同时，本发明利用胸腺嘧啶DNA糖基化酶和尿嘧啶DNA糖基化酶的自身修复特性，使整个修复反应严格按照自然修复机制进行，因此本方案的特异性很高。
📄 2017101663369
📂 C12Q1_6844
👤 山东师范大学
📅 2017-03-20
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