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本发明公开了一种基于铂纳米颗粒催化H2O2分解产生气压变化即时检测端粒酶活性的方法，当存在活性端粒酶时，磁珠表面修饰的端粒酶引物会与端粒酶结合，使得端粒酶引物沿着其3’末端被延长，并形成一条带有TTAGGG重复序列的DNA单链，这条长的DNA单链能够与许多cDNA杂交，通过将cDNA修饰到铂纳米颗粒表面，就使得铂纳米颗粒固定到了磁珠的表面，然后利用铂纳米颗粒催化过氧化氢分解产生氧气，体系气压发生变化，再采用便携式气压计检测体系的气压值，即可实现对端粒酶活性的即时检测。本发明检测方法简单、快速、灵敏，可以检测不同种类肿瘤细胞中端粒酶活性的表达水平，在以端粒酶为靶点的癌症的治疗诊断方面具有重要的意义。

本发明涉及一种免标记甲基转移酶的检测方法及其用途。所述单锥形纳米孔道由苯二甲酸乙二醇酯(PET)核孔膜用径迹刻蚀法制备，经过聚乙烯亚胺和锆离子修饰后作为信号输出装置。结合DNA级联信号放大反应，开发了一种超灵敏、无标记的DNA腺嘌呤甲基化甲基转移酶(Dam‑MTase)和CpG甲基转移酶(M.SssI‑MTase)检测方法。利用纳米孔的高灵敏度和MTase/内切酶识别的特异性，该方法可以完成对Dam‑MTase的高灵敏检测，在生物检测和肿瘤临床诊断领域中具有巨大的应用潜力。

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种基于无猝灭分子信标检测端粒酶活性的方法。本发明提供了一种用于检测癌细胞中端粒酶活性的2‑氨基嘌呤无淬灭分子信标检测方法。从癌细胞中提取端粒酶，催化重复单位(TTAGGG)n添加到底物链产生端粒重复的延伸产物，随着KF聚合酶的加入，引物沿着模板延伸形成双链，双链中2‑AP MB的链可以被T7外切核酸酶降解，释放出游离的2‑AP分子和引物延伸链，自由引物延伸链可以与另外的2‑AP MB结合形成新的双链，引发下一轮T7外切酶降解。本发明相比现有技术中的分子信法，实现了双重信号放大，具有高灵敏度和特异性，应用于抗肿瘤药物的开发具有重要意义。

本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及基于三通路结构驱动链置换反应及DNA walker技术驱动球形核酸酶的化学发光技术检测尿嘧啶糖基化酶。为了解决以上现有技术中检测尿嘧啶糖基化酶的方法存在操作复杂、灵敏度比较低、成本高的问题，一种基于三通路结构和DNA walker两种纳米技术的生物传感器利用球形核酸酶催化鲁米诺发生化学发光反应进行检测。制备方法：纳米金的制备；球形核酸的制备；均相中形成球形核酸酶用于催化鲁米诺的化学发光反应。利用了尿嘧啶糖基化酶对U碱基的特异性识别和切除，实现目标的特异性检测；同时采用DNA walker纳米技术实现目标的快速、高灵敏性检测。

本公开提供了一种DNA功能化纳米金探针及其检测端粒酶的应用，纳米金探针包括纳米金颗粒和DNA双链Y型探针；DNA双链Y型探针包括Linker-DNA1、Linker-DNA2、TP、Mismach-DNA四种DNA单链，Linker-DNA1的第一区段与Linker-DNA2的第一区段互补；Mismach-DNA分别与Linker-DNA1的第二区段和Linker-DNA2的第三区段均能与Mismach-DNA互补；Linker-DNA1的第三区段和Linker-DNA2的第二区段均能与TP互补，Linker-DNA1的5’端与纳米金颗粒连接，Mismach-DNA的3’端连接荧光基团。

本发明公开了了β‑葡萄糖转移酶的荧光生物传感器及检测方法与应用，包括检测探针、内切酶、外切酶、解旋酶、聚合酶、引物DNA、SYBR染料；所述检测探针为单链DNA形成的发夹结构，检测探针具有能够被内切酶识别并切割的识别位点，所述识别位点含有5‑羟甲基胞嘧啶，所述单链DNA的两端采用磷酸酯修饰；所述检测探针被内切酶识别并切割后，能够被外切酶进一步切割；所述解旋酶能够将发夹结构的茎部解旋；所述引物DNA与所述单链DNA互补后，在聚合酶的作用下形成双链DNA；所述SYBR染料能够与所述双链DNA进行特异性结合。本发明提供的荧光生物传感器对β‑葡萄糖转移酶的灵敏度高、特异性好、检测时间短。

本发明属于DNA甲基化转移酶检测技术领域，具体涉及一种检测DNA甲基化转移酶的纳米金生物传感器、其检测方法及应用。本发明的方法可以同时检测多种DNA甲基化转移酶，并且该方法特异性好，灵敏度高。本发明使用甲基介导的核酸内切酶GlaI来切割的5‑甲基胞嘧啶(5‑mC)的特异性位点，并且将单分子检测与信号探针的循环裂解相结合，可用于单分子水平上同时检测多种DNA甲基化转移酶；进一步还可以用于区分不同种类的DNA甲基化转移酶，筛选潜在的抑制剂，并可测量人血清样品中DNA甲基化转移酶的活性，在生物医学研究，临床诊断，药物发现和癌症治疗方面具有巨大的潜力。

本发明属于生物分析技术领域，具体涉及一种检测多核苷酸激酶的试剂盒及其检测方法。本发明试剂盒包括：探针A，探针S，混合液A，模板DNA，λ核酸外切酶，多核苷酸激酶标准品，1×NEBuffer和10mM三磷酸腺苷。本发明试剂盒检测方法操作简单、降低了检测成本，且灵敏性高、特异性强，可以应用于复杂样品的检测。并且本发明试剂盒还可应用于PNK活性抑制性检测中。