本发明公开了一种DNA探针‑菌落原位杂交技术筛选麻痹性贝毒产生菌株的方法,包括:预处理、杂交、筛选,通过特定的正向引物与反向引物,经经聚合酶链式反应扩增合成了以地高辛标记的单链DNA探针,将待测试菌株的DNA与DNA探针进行杂交作用,通过显色测试杂交匹配结果筛选出产毒菌株。有益效果为:本发明方法可在8‑10小时内完成90个样品筛选,方法快速高效,特异性强,而且准确性高;本发明方法操作步骤简单,工作量小,周期较短,所用试剂与材料均为生化试验常用试剂,对人体无害,对环境友好,分析成本低廉,具有较高的市场前景与经济价值。
📄 2017108659839
📂 C12Q1_6841
👤 浙江海洋大学
📅 2017-09-22
本发明涉及海洋生物技术领域,尤其涉及一种快速筛选产生鳍藻毒素微生物菌株的方法,包括以下步骤:(1)预处理:制作并固定待测菌株的DNA;(2)杂交:将待测菌株的DNA与标记单链DNA探针进行杂交作用;(3)筛选:通过特异性检测待测菌株是否产生鳍藻毒素。本发明通过菌落原位斑点分子杂交,标记单链DNA探针可特异性检测待测菌株DNA样品中是否产生鳍藻毒素;成本低、快速、准确性及灵敏度高的特性;分析成本低,周期短,所用试剂绿色环保,对人体无害,具有较高的市场前景与经济价值。
📄 2018108847175
📂 C12Q1_6841
👤 浙江海洋大学
📅 2018-08-06
本发明涉及海洋生物技术领域,尤其涉及一种快速筛选产生河豚毒素微生物菌株的方法及其所用的地高辛标记DNA探针,该方法使用的探针是与待测DNA碱基互补的254个碱基长度的单链DNA,探针3′端被地高辛标记。通过菌落原位斑点分子杂交,该探针可特异性检测待测菌株DNA样品中有否有河豚毒素合成sxt基因核酸的存在,筛选出产毒阳性菌株。本发明涉及的方法利用菌株DNA原位提取物进行菌落斑点杂交,可在8‑10小时内完成96个样品筛选。本发明的方法快速,特异性强且准确性高。
📄 2018108968964
📂 C12Q1_6841
👤 浙江海洋大学
📅 2018-08-08
本发明涉及海洋生物技术领域,尤其涉及一种快速筛选产生膝沟藻毒素微生物菌株的方法及其所用的地高辛标记DNA探针,该方法使用的探针是与待测DNA碱基互补的248个碱基长度的单链DNA,探针3′端被地高辛标记。通过菌落原位斑点分子杂交,该探针可特异性检测待测菌株DNA样品中有否有膝沟藻毒素合成(sxtS)基因核酸的存在,筛选出产毒阳性菌株。本发明涉及的方法利用菌株DNA原位提取物进行菌落斑点杂交,可在8-10小时内完成96个样品筛选。本发明的方法快速,特异性强且准确性高。
📄 2018108978468
📂 C12Q1_6841
👤 浙江海洋大学
📅 2018-08-08
本发明公开了一种环状RNA原位检测方法,通过滚环扩增实现对信号的放大,其前提是将检测目标核酸分子转化为检测与目标核酸分子特异对应的环状核酸分子。该方法通过一条单链DNA构成锁式探针的两段区域与目标核酸的靶序列特异杂交,当探针两端的碱基与靶序列完全互补时,DNA连接酶将探针两端连接形成一个环状DNA分子,而后通过滚环扩增对环状DNA分子进行扩增,最后再用检测探针检测扩增产物实现对目标RNA的检测。本发明能够高灵敏地检测环状RNA在不同组织或者同一组织不同部位的存在和分布状况。
📄 2021108535476
📂 C12Q1_6841
👤 华侨大学
📅 2021-07-27
本发明公开了一种miRNA检测与成像方法、组合物以及试剂盒,在细胞内环境下,当目标miRNA存在时,其诱导底物探针和染料探针发生熵驱动的循环反应,生成RNA适配体Corn的G‑4链体结构,使得体系中本来无荧光的DFHO产生荧光,从而通过检测体系的荧光强度实现目标miRNA的检测,或者通过荧光成像系统实现目标miRNA的成像。本发明利用在胞内环境下,由目标物miRNA诱导底物探针和染料探针发生熵驱动的循环反应,生成G‑四链体Corn的空间结构,使得体系中本来无荧光的DFHO产生荧光这一原理,构建了生物体系内miRNA的高灵敏度监测的新方案,能够实现miRNA的原位成像与高灵敏度、高特异性检测。
📄 2021112496116
📂 C12Q1_6841
👤 苏州科技大学
📅 2021-10-26