本发明中公开了一种基于CRISPR/Cas12a的用温度计检测链格孢菌的方法。本发明利用AuNPs的高比表面积和LbCas12a高效剪切能力的双重信号放大策略,实现了检测信号的有效放大,对链格孢菌的检测具有非常高的灵敏度;同时本发明利用CrRNA和目标DNA进行特异性识别,对链格孢菌的检测具有非常好的特异性,可实现对待测样品中链格孢菌的快速、准确、灵敏的检测;本发明中无需使用大型检测仪器和有毒试剂,在本发明的检测方法中,仅使用温度计就可以实现对链格孢菌的便携式现场检测。
📄 2022107991739
📂 C12Q1_682
👤 西南大学
📅 2022-07-06
本发明涉及一种LAMP氢离子驱动i‑motif变换比率型电化学传感器及构建方法,通过常规LAMP技术与电化学检测相结合,利用目标物短链DNA延伸形成的双哑铃状结构中间体进行LAMP扩增,其副产物H+诱导i‑motif构象转换实现比率型电化学信号的显著改变和放大输出,避免常规LAMP技术模板DNA及引物设计的复杂性和局限性,保障LAMP高特异性和简便快捷,同时提升检测灵敏度。两种电化学探针的信号比值能有效降低背景信号,确保高特异性和高灵敏度、良好的稳定性和再生性。本发明建立的电化学检测方法简单方便快捷;无需引入其他辅助反应物,提高定量检测的特异性和灵敏度,缩短分析时间,降低检测成本。
📄 2019112357489
📂 C12Q1_6825
👤 西南大学
📅 2019-12-05
本发明公开了一种检测Dam甲基转移酶的荧光化学传感器包括:Dam甲基转移酶检测探针和辅助探针;所述Dam甲基转移酶检测探针为一个具茎环结构的发夹DNA探针,两条茎结构互补形成双链DNA,所述双链DNA具有Dam甲基转移酶的识别位点;所述发夹DNA探针3'末端使用氨基修饰;所述Dam甲基转移酶的识别位点为5'‑G‑A‑T‑C‑3'的回文序列;所述辅助探针为一个近3'末端具有脱嘌呤嘧啶位点(AP位点)的富T单链DNA序列。本发明荧光化学传感器制备及检测方法简单,极大提高了检测灵敏度同时有效防止非特异性反应的发生,可实现在复杂生物样品中对Dam甲基转移酶的精准检测。
📄 2017109455839
📂 C12Q1_6825
👤 山东师范大学
📅 2017-09-30
本发明公开基于电化学电势预处理技术快速检测核酸的方法及应用。该方法是PBS缓冲液为电解液,探针与目标核酸片段加入PBS缓冲液中,按碱基互补配对原则形成核酸杂化溶液。传感电极在大于1.8V的电势范围内,进行电化学预处理,而后运用SWV选择性检测目标核酸。该电化学预处理技术的核酸检测方法在疾病特征miRNA相关电化学生物传感检测及医学诊断及食品和环境等病原体检测领域中的应用。该检测方法应用于核酸时具有如下特点:高选择性,对核酸分子能够实现单碱基错配检出;高灵敏度,检测灵敏度达5×10-18M;检测结果完全能够重复;操作过程经济简单,不存在链反应,无需扩增,无需荧光指示剂。
📄 2017111872746
📂 C12Q1_6825
👤 杭州电子科技大学
📅 2017-11-24
本发明提供一种单分子计数检测基因组中DNA损伤的荧光化学传感器、方法和应用,属于分子生物学与生物检测技术领域。本发明利用模板非依赖型的TdT聚合酶取代传统的模板依赖性聚合酶进行损伤位点的标记,可以用任意的Biotin‑dNTP来检测任意的DNA损伤碱基,而无需考虑必须使用与要检测的损伤碱基互补配对;本发明既可以检测孤立的DNA损伤位点又可以检测聚集的DNA损伤位点,因此具有良好的实际应用之价值。
📄 2019106425578
📂 C12Q1_6825
👤 山东师范大学
📅 2019-07-16
本发明公开了一种基于环金属Ir(III)配合物的凝血酶光电化学传感器的制备方法。该传感器以环金属配铱配合物作为光电活性材料,通过Au‑S键将其组装在纳米金上制备了纳米探针。凝血酶识别体系采用适体与凝血酶的结合产生临近效应而引发的DNA置换,当存在凝血酶时,含有凝血酶适体片段的单链DNA S1和S2的局部浓度增加,诱导预先杂交的S1/T与S2发生链置换反应使单链T被释放。释放的T与工作电极上固定的捕获发夹H1杂交,引发催化发夹自组装反应,在工作电极表面形成得到大量的H1/H2杂交链,其末端暴露的单链DNA用于捕获信号纳米金探针,实现光电流信号的响应,具有高的灵敏度及良好的选择性。
📄 2019107524532
📂 C12Q1_6825
👤 上海冠东生命科学有限公司
📅 2019-08-15
本发明属于生物分析领域,涉及基于氧化损伤碱基的荧光探针及用于直接检测DNA甲基化的试剂盒与方法。本发明首次开发了一种基于氧化损伤碱基的荧光探针,通过循环切割信号放大准确检测单个位点的DNA甲基化。hOGG1酶可以特异性切割8‑oxoG/5‑mC碱基对中的8‑oxoG碱基,但对8‑oxoG/U碱基对中的8‑oxoG碱基无活性。目标物甲基化DNA的存在可以在hOGG1酶的辅助下诱导荧光探针的循环裂解,从而导致增强的荧光信号。该方法灵敏度高,特异性好,可以检测单个甲基化位点,检测下限达到3.458×10‑15M。而且该方法能在复杂的DNA混合体系中区分出0.01%的甲基化水平,也可以检测基因组中的DNA甲基化水平。
📄 2020105183127
📂 C12Q1_6827
👤 山西晶赛生物科技有限公司
📅 2020-06-09
本发明提供了一种检测miRNA的自产生共反应剂信号放大电化学发光体系,涉及miRNA检测技术领域。本发明所述体系利用大表面积的纳米传感基底,通过构建修饰发卡结构的捕获探针实现了靶标miRNA存在时共反应剂的自产生,并且结合链置换核酸等温信号放大策略对信号进行放大,可实现目标miRNA的高灵敏、高特异性的电化学发光检测。利用本发明所述体系进行miRNA的检测时,可提高检测的准确性和灵敏度,同时排除了人为干扰因素。
📄 2020112286217
📂 C12Q1_682
👤 青岛科技大学
📅 2020-11-06
本公开涉及DNA甲基化检测技术领域,具体为一种检测DNA甲基化的荧光生物传感器、检测方法和应用。荧光生物传感器包括限制性核酸内切酶HpaII、含有AP位点的信号探针、核酸内切酶IV和链霉亲和素修饰的磁珠;所述探针由生物素和Cy5共同修饰。将核酸内切酶IV(Endo IV)辅助信号放大与单分子荧光检测相结合,用于DNA甲基化的超灵敏检测。该方法操作简单、灵敏度高、特异性好,甚至能够定量单个癌细胞中的DNA甲基化水平,在疾病诊断和临床医学研究中具有巨大潜力。
📄 2021100495517
📂 C12Q1_682
👤 智源创新生物科技(宁波)有限公司
📅 2021-01-14
本发明属于信号放大技术领域,具体涉及一种基于DNA生物传感器的二级放大方法,包括以下步骤:S1、将传感器表面依次用无水乙醇、去离子水冲洗并干燥,并进行氧等离子体处理,以实现对芯片表面硅烷化处理,形成末端氨基;S2、将探针DNA修饰到硅纳米线芯片上,以制得DNA生物传感器;S3、将ctDNA溶液滴加至DNA生物传感器表面进行杂交;S4、制得表面修饰有信号DNA的金纳米颗粒;S5、将金纳米颗粒加入到硅纳米线芯片上,以实现一级放大;S6、加入RCA引物和模板DNA,添加RCA缓冲液,以使金纳米颗粒上的引物DNA滚环扩增,以实现二级放大;本发明的DNA生物传感器能够用于信号二次放大,进一步提高传感器的检测限和灵敏度。
📄 2021101465843
📂 C12Q1_682
👤 杭州电子科技大学
📅 2021-02-03
本发明涉及miRNA检测技术领域,具体涉及一种D‑A‑D型FRET DNA纳米机器及其制备方法和应用,使用四条退火后的发夹DNA依次修饰DNA四面体,得到D‑A‑D型FRET DNA纳米机器,四条发夹DNA分别为HMg、H1‑FAM、H2‑TAMRA和H3‑FAM。本发明基于HMg剪切与催化发夹放大,构建了D‑A‑D型FRET DNA纳米机器,该纳米机器可实现对miRNA的高灵敏检测和原位荧光成像,增强了荧光FRET效率,提高了检测灵敏度,解决了发夹DNA细胞膜穿透性和生物稳定性差的技术问题。
📄 2021106312596
📂 C12Q1_682
👤 青岛科技大学
📅 2021-06-07
本发明属于生物传感器技术领域,涉及一种基于DNA walker的电化学生物传感器的制备方法及其应用;首先将DNA walker‑AFB1适配体与发夹DNA1、发夹DNA2混合,滴加到金电极表面,反应后再滴加MCH,经常温孵育得到电化学生物传感器;然后,在其表面修饰AFB1,锚定探针1、短链DNA1和短链DNA 2的混合液,浸入亚甲基蓝溶液,通过测定传感器电流值,与AFB1浓度构建得到标准曲线;最后通过测定未知样品的电流值,代入构建的标准曲线,即可实现未知样品中AFB1的检测;本发明以极少量的目标物AFB1可以进行双重信号放大,得到更大的亚甲基蓝电化学信号,检测选择性好、速度快、灵敏度高。
📄 2020109295935
📂 C12Q1_6825
👤 江苏大学
📅 2020-09-07