专利交易市场

本发明提供了一种细胞凋亡检测试剂盒及其检测方法，其中，细胞凋亡检测试剂盒包括以下体积原料：2‑3μL膜联蛋白V、0.5‑1.5mL结合液、0.5‑1.5mL封闭液、2‑3μL活性染料Ⅰ、4‑6μL活性染料Ⅱ，所述结合液由质量体积比g/mL为(0.6‑1.0):(0.05‑0.1):(0.8‑1.2):(96‑98)的甾体皂甙、钙离子溶液、4‑羟乙基哌嗪乙磺酸、水组成，所述封闭液由质量体积比g/mL为(0.6‑0.8):(6‑8):(6‑10)的鱼精蛋白、氯化钠溶液、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐溶液组成。本发明制得的细胞凋亡检测试剂盒及其检测方法可以减少活性染料的荧光淬灭、提高膜联蛋白V和磷脂酰丝氨酸的结合能力，进而提高检测出的细胞凋亡率、细胞坏死率，提高检测结果的准确性。

本发明涉及一种基于细胞组装技术的糖尿病病理模型及其在高内涵药物筛选中的应用。通过将脂肪干细胞和仿细胞外基质材料组装形成具有一定孔隙率的含有细胞的三维结构体；通过控制诱导分化条件，使三维结构体内通道表面的脂肪干细胞分化为内皮细胞，基质材料内部的脂肪干细胞则分化为脂肪细胞；将从动物体内分离的胰岛直接组装在三维结构体的空隙中。对上述的系统模型给予高浓度的葡萄糖、脂肪酸胰岛素、TNF或脂肪细胞分泌因子等长时间刺激，诱导产糖尿病病理症状。在培养系统中加入待测药物，检测模型在正常和病理条件下的相关标记物水平，可以分析待测药物的药理活性，从而进行药物的高内涵筛选。

本发明公开了一种吸烟对卵母细胞质量影响的评估方法，具体是将卵母细胞放在含有不同浓度可替宁的培养液中成熟培养。最后通过检测卵母细胞成熟率、染色体非整倍性、肌动蛋白的分布、线粒体膜电位、胞内活性氧水平、纺锤体形态、成熟卵母细胞染色体排列形态、体外受精后精子结合数量和孤雌激活后原核形成率等这些指标来评估吸烟对卵母细胞质量的影响。本发明通过大量的客观试验，评估了吸烟对卵母细胞质量的影响，为吸烟女性生殖能的维持提供了理论数据的参考。

本发明公开了细胞表面粘附分子CD22的用途，具体为细胞表面粘附分子CD22在筛选用于镇痛的非成瘾性药物中的应用。本发明通过遗传学手段敲除CD22，发现敲除CD22的小鼠机械性痛觉过敏；通过鞘内注射靶向CD22的siRNA，发现抑制CD22表达会导致小鼠机械性痛觉过敏；通过尾静脉注射靶向CD22抗体，发现抑制CD22也会导致小鼠机械性痛觉过敏；通过尾静脉注射CD22过表达病毒，再进行SNL手术，可减轻SNL引起的神经病理性疼痛。本发明有助于更好地理解细胞表面粘附分子在疼痛发展中的重要作用，为临床镇痛药物研制以及预防和治疗提供了新的可能性。

本发明公开了一种测算污染物生态毒性效应半效浓度的方法，基于种群水平上的毒性效应实验结果，利用种群间的生态关系构建群落毒性效应模型，将若干种群水平上的反应终点与群落水平上的反应终点关联起来，由种群水平上的污染物浓度与毒性效应之间的定量关系构造出群落水平上的污染物浓度与毒性效应之间的定量关系，以一定污染物浓度下群落中各种群共同周期积分生物量中值偏离对照群落共同周期积分生物量中值的程度作为半效浓度的判据，计算污染物生态毒性效应半效浓度。本发明不仅提高了半效浓度的生态相关性，还可以充分利用现有的大量单物种种群毒性效应实验数据，节约社会资源。