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本发明提供了一种对DNA进行可逆保护和分离的方法，首先将目标DNA分子的5’端进行磷酸化；然后将5’端腺苷化修饰；终止反应后获得的样品中加入对腺苷化修饰DNA敏感的核酸外切酶消化模板；最后将获得的腺苷化修饰DNA，即分离所得目标DNA，进行测序鉴定等技术分析，所得序列的5’端即为腺苷化修饰位点。本发明提供的方法，填补了现有技术无法精确定位基因组DNA上断裂位点的空白，能够实现对不同长度和不同来源的DNA样品进行断裂位点的定量和定位分析，使用简便，易于操作，而且对样品无特殊要求，准确率高、检测背景影响低、分辨率高。

本发明公开了一种核酸免提取试剂及其在核酸检测中的应用和使用方法，属于核酸检测技术领域，该核酸免提取试剂是由海藻糖、PEG8000、Tris‑HCl、EDTA、Triton X‑100及核酸释放剂组成的混合液体；本发明通过Triton X‑100和核酸释放剂的协同作用，能够高效裂解病原微生物，快速释放其中的DNA或RNA。一方面，通过EDTA能够鳌和金属离子，降低DNase和RNase的酶活，另一方面，通过海藻糖和PEG8000在RNA和DNA表面形成保护层，使其能够在溶液中稳定存在。最后通过Tris稳定该试剂的pH，以确保RNA或DNA均可稳定保存。通过上述组份的协同作用，本发明的核酸免提取试剂能够在室温条件下直接完成核酸的释放，避免了加热、离心、洗涤等繁琐操作，所得产物可以直接用于PCR扩增。

本发明公开了一种适用于ATAC‑seq测序的玉米胚乳提核方法。包括以下步骤：(1)从玉米种子中取出种皮，胚，收集胚乳，长期可保存于‑80℃中，胚乳取大约5g，在液氮中手动研磨成粉末；(2)将10mL体积的蔗糖缓冲液添加到每份粉末样品中，充分混匀，再通过100um孔筛过滤；(3)将步骤(2)的滤液再通过38um孔网，然后将产物700×g离心5分钟，收集上清液；(4)将上清液通过38um筛网过滤并2000×g离心5分钟，去除上清液，然后将沉淀重新悬浮在10mL蔗糖缓冲液中；(5)再次通过38um筛孔过滤，2000×g离心5‑10分钟，去除上清液，然后将沉淀重悬于5mL的重悬缓冲液；(6)再1000×g离心5分钟后，弃去上清液，将沉淀悬浮在5mL的含有蛋白酶抑制剂的pbs溶液中，取10‑20uL使用DAPI等体积染色10分钟，在荧光显微镜下观察。本发明制备得到的胚乳细胞核数量多、活性高，可以克服储藏组织淀粉含量高的影响，为后续单细胞测序、CUT&TAG、ATAC‑seq等相关研究提供有力的技术支持，提取效果也会对实验数据产生重要的影响。

本发明公开了一种DNA模板制备液，包括以下成分：单价阳离子盐、乙醇，溶剂为水；其中所述单价阳离子的终浓度为0.1‑0.8M，所述乙醇的终浓度为0.5‑30％；还公开了一种DNA模板的制备方法，包括以下步骤：(1)将抗凝血液和DNA模板制备液以体积比1:1‑200混合；(2)将步骤(1)得到的混合液直接离心或静置5min后离心，上清液即为DNA模板。本发明即用型的DNA模板制备液，制备液中无需蛋白酶或其他的高价盐离子，且获取过程简单，无需加热处理、时间短；本发明的DNA模板制备液与血液的比例要求不严格，在宽的范围内制备DNA模板均可很好地用于PCR扩增。