本发明涉及一种重组果胶酶及其基因、重组载体、制备方法和应用,该基因至少含有下列核苷酸序列之一的DNA片:1)序列表中SEQ ID NO.1的核苷酸序列;2)与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列具有90%以上同源性、且编码相同生物学功能蛋白质的核苷酸序列;或3)与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列杂交且编码相同生物学功能蛋白质的核苷酸序列。按照本发明所述的基因序列进一步构建重组载体并转化酵母,可实现该重组果胶酶在高密度发酵条件下的组成型分泌表达,通过单纯的镍亲和纯化,即可得到纯度高于95%和蛋白浓度较高的活性蛋白,该活性蛋白在低温下具有很强的水解果胶活性,将为提高果汁的出汁率提供一种新型且高效的酶产品。