本发明公开了一种脂肪酸光脱羧酶突变体及其在L‑草铵膦合成中的应用，该脂肪酸光脱羧酶突变体为将SEQ ID No.2所示氨基酸第402位甘氨酸突变为苯丙氨酸；或者，第402位突变的同时第370位苏氨酸突变为精氨酸；或者，第402位突变、第370位突变的同时第513位丝氨酸突变为甘氨酸等。本发明利用定点饱和突变技术脂肪酸光脱羧酶基因进行突变，发现第370位、第371位、第402位、第513位、第514位是影响酶活和立体选择性的关键位点，获得酶活和ee值远高于母本脂肪酸光脱羧酶的突变体，最高的转化率为50％，产物ee值为96％。
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