本发明提供了一种酯酶在拆分(R,S)-5-己内酯中的应用，所述酯酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码基因如SEQ ID NO.2所示。本发明酯酶基因可与表达载体连接构建得到含该基因的胞内表达重组质粒，再转化至大肠杆菌菌株中，获得重组大肠杆菌工程菌；该重组大肠杆菌经细胞破碎，分离纯化获得重组酯酶；该重组酯酶具有催化拆分(R,S)-5-己内酯的能力，可以获得(S)-5-己内酯，对映体过量值>98％和转化率达到49.6％，拆分效率和产品收率高。
📄 2019102177066
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2019-03-21
本发明提供了一种解淀粉芽孢杆菌酯酶在拆分N-BOC-DL-α-氨基丁酸甲酯制备N-BOC-L-α-氨基丁酸甲酯的应用，所述解淀粉芽孢杆菌酯酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，以发酵培养获得的湿菌体经冷冻干燥后得到的冻干菌体为催化剂，外消旋N-BOC-α-氨基丁酸甲酯为底物，以pH7.5磷酸缓冲溶液为反应介质，在20-60℃、1000rpm条件下进行拆分制备N-BOC-L-α-氨基丁酸甲酯，对映体过量值>99％，N-BOC-L-α-氨基丁酸甲酯的质量收率达到95.6％。
📄 202010008780X
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2020-01-06
本发明公开了一种生物催化制备(R)‑1‑(3‑三氟甲基苯基)乙醇的方法，以重组大肠杆菌经发酵培养获得的湿菌体为催化剂，以间三氟甲基苯乙酮为底物，加入辅助底物，以pH 6.0～8.0磷酸缓冲液为反应介质构成转化体系，于20～40℃、200rpm条件下进行生物催化不对称还原反应，反应结束后，反应液经分离纯化得到(R)‑1‑(3‑三氟甲基苯基)乙醇；本发明当底物浓度为400mM时，产物(R)‑1‑(3‑三氟甲基苯基)乙醇的产率为74.2％，e.e.值>99.9％，表现出更优的催化效率。
📄 2020109867258
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2020-09-18
本发明提供了一种脂肪酶在制备D-托品酸甲酯中的应用，所述脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码基因如SEQ ID NO.2所示。以重组脂肪酶工程菌发酵培养获得的湿菌体经冷冻干燥后得到的冻干菌体为催化剂，外消旋托品酸甲酯为底物，以pH7.0磷酸缓冲溶液为反应介质，进行拆分制备D-托品酸甲酯，对映体过量值>99％，D-托品酸甲酯的收率达到95.0％。
📄 2019106876341
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2019-07-29
本发明提供了一种脂肪酶在拆分BOC‑DL‑脯氨酸甲酯制备BOC‑D‑脯氨酸甲酯中的应用，所述脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码基因如SEQ ID NO.2所示。以重组脂肪酶工程菌发酵培养获得的湿菌体经冷冻干燥后得到的冻干菌体为催化剂，外消旋BOC‑DL‑脯氨酸甲酯为底物，以pH7.0磷酸缓冲溶液为反应介质，进行拆分制备BOC‑D‑脯氨酸甲酯，对映体过量值>99％，BOC‑D‑脯氨酸甲酯的收率达到96.0％。
📄 2020100088361
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2020-01-06
本发明公开了一种生物多酶偶联法氧化还原不对称制备L‑草铵膦的方法，以D,L‑草铵膦为原料，经酶催化体系催化获得L‑草铵膦，所述酶催化体系包括用于将D,L‑草铵膦中的D‑草铵膦催化为2‑羰基‑4‑[羟基(甲基)膦酰基]丁酸的D‑氨基酸氧化酶突变体、以及用于将2‑羰基‑4‑[羟基(甲基)膦酰基]丁酸催化还原为L‑草铵膦的转氨酶，所述D‑氨基酸氧化酶突变体由野生菌Rhodotorula taiwanensis中的D‑氨基酸氧化酶突变所得，突变位点选自以下四种中的一种：(1)M213S；(2)M213S‑N54V‑F58E；(3)M213S‑N54V‑F58E‑D207A；(4)M213S‑N54V‑F58E‑D207A‑S60T。本发明D‑氨基酸氧化酶突变体具有更好的催化效率，以外消旋D,L‑草铵膦为底物进行催化反应时，转化率远高于野生型酶，PPO产率也大幅提升。
📄 2020101927744
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2020-03-18
本发明提供了一种重组脂肪酶在拆分(R,S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸甲酯中的应用，所述重组脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明重组脂肪酶基因可与表达载体连接构建得到含该基因的胞内表达重组质粒，再转化至大肠杆菌中，获得重组脂肪酶基因大肠杆菌。该重组大肠杆菌经发酵培养后冻干获得重组脂肪酶粗酶粉；该重组脂肪酶具有催化拆分(R,S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸甲酯的能力，可制备左乙拉西坦中间体高光学纯(S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸。与传统化学法拆分相比，该生物拆分法具有操作条件简单，拆分效率和产物光学纯度高等优点。
📄 2019102835003
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2019-04-10
本发明公开了一种L-草铵膦化学酶法生产方法。本发明通过对来源于巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)的野生型酰胺酶基因进行突变并表达，获得了高活力、立体选择性严格的酰胺酶突变体，并利用树脂吸附制备了固定化酰胺酶。利用酰胺酶全细胞或固定化酶不对称催化N-苯乙酰-D,L-草铵膦合成L-草铵膦合成L-草铵膦，酶反应后的N-苯乙酰-D-草铵膦经一步加热消旋化可重新生成外消旋N-苯乙酰-D,L-草铵膦，大幅提高了手性拆分的原子利用率，使酰胺酶催化N-苯乙酰-D,L-草铵膦合成L-草铵膦路线的理论收率达到100％，为L-草铵膦的高效化学酶法合成奠定了基础。并通过。
📄 2019105160739
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2019-06-14
本发明公开了一种生物酶法去消旋化制备L‑草铵膦的方法、草铵膦脱氢酶突变体及应用。一种生物酶法去消旋化制备L‑草铵膦的方法，以D,L‑草铵膦为原料，经多酶催化体系催化获得L‑草铵膦，所述酶催化体系包括用于将D,L‑草铵膦中的D‑草铵膦催化为2‑羰基‑4‑[羟基(甲基)膦酰基]丁酸的D‑氨基酸氧化酶、以及用于将2‑羰基‑4‑[羟基(甲基)膦酰基]丁酸催化还原为L‑草铵膦的草铵膦脱氢酶突变体，所述草铵膦脱氢酶突变体由野生菌Thiopseudomonas denitrificans中的草铵膦脱氢酶突变所得，突变位点为：V377S。本发明草铵膦脱氢酶突变体具有更好的催化效率，以外消旋D,L‑草铵膦为底物进行催化反应时，转化率远高于野生型酶，PPO产率也大幅提升。
📄 2020101919451
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2020-03-18
本发明公开了一种(S)‑邻氯苯甘氨酸甲酯酶法合成方法，所述方法为：以(R,S)‑邻氯苯甘氨酸甲酯为底物，以水解酶为催化剂，以pH 5‑9的缓冲液为反应介质构成转化体系，在20‑40℃、100‑200rpm条件下进行拆分反应，反应完全后，获得(S)‑邻氯苯甘氨酸甲酯；所述水解酶包括蛋白酶CES P‑1、蛋白酶6SD、固定化蛋白酶CES P‑1或固定化蛋白酶6SD。本发明固定化酶酶活回收率达95.91％，且可稳定使用15批次；固定化蛋白酶在三相体系中直接一步法不对称拆分(R,S)‑邻氯苯甘氨酸甲酯，底物浓度从2g/L提高至12g/L，最终可以获得29.26％光学纯(S)‑邻氯苯甘氨酸甲酯。
📄 2020106419438
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2020-07-06
本发明公开了一种氨基酸消旋酶及其在催化氨基酸消旋中的应用，属于生物技术领域。所述氨基酸消旋酶为氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的多肽Ⅰ或与SEQ ID NO.1所示氨基酸序列具有至少70％同一性且具有催化氨基酸消旋功能的多肽Ⅱ，所述氨基酸消旋酶对Leu、Met等多种氨基酸异构体具有消旋活性，且具有热稳定性，可将其应用到酶催化L‑Leu/D‑Leu、L‑Met/D‑Met的消旋化，对于实现氨基酸对映体的相互转化具有重要意义。
📄 2020100989122
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2020-02-18
本发明公开了一种利用土星轮头酵母制备(S)‑[3,5‑二(三氟甲基)苯基]乙醇的方法，以土星轮头酵母ZJPH1807经发酵培养获得的湿菌体为酶源，以3,5‑双三氟甲基苯乙酮为底物，于pH值6.0～8.0的缓冲液中构成转化体系，在25～45℃、100‑200rpm条件下进行转化反应，反应结束后将转化反应液进行分离纯化，获得(S)‑[3,5‑二(三氟甲基)苯基]乙醇；本发明在pH 7.5的磷酸缓冲液体系中，菌体加量为150g/L，加入128.07g/L(500mM)的底物，转化24h，产物的产率为80.97％。
📄 2020108487641
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2020-08-21
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