本发明公开了一种重组羰基还原酶突变体、基因、载体、工程菌及其应用，所述突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第95位、第144位或第156位进行单点突变获得的。本发明提供一种具有还原(S)‑6‑氯‑5‑羟基‑3‑氧代己酸叔丁酯的重组羰基还原酶突变体，该突变体相比于野生型酶在转化上述反应时催化活力和底物耐受性大大提高，反应进程耗时明显缩短。相比于化学法制备(3R,5S)‑6‑氯‑3,5‑二羟基己酸叔丁酯，本发明提供的技术所得产品立体选择性高，简化了繁琐的化学催化步骤，反应条件更加温和，对设备要求低，降低了反应成本，且对环境友好。
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