摘要
本发明公开了一种D-氨基酸氧化酶突变体及其应用,该突变体由SEQ ID No.1所示氨基酸的第52位、第54位、第58位、第213位和第335位进行单突变或多突变获得;其中,第52位的甘氨酸突变为亮氨酸,第54位的天门冬酰胺突变为缬氨酸,第58位的苯丙氨酸突变为谷氨酰胺,第213位的蛋氨酸突变为丝氨酸,第335位的丝氨酸突变为甘氨酸。本发明通过利用定点饱和突变技术对SEQ ID No.2所示的D-氨基酸氧化酶基因进行突变,获得酶活和产物转化率远高于野生型的突变体,提高了4-(羟基甲基磷酰基)-2-羰基-丁酸生产工艺中的产物收率。