本发明公开了一种反式茴香脑加氧酶的突变体和突变株，所述反式茴香脑加氧酶的突变体与野生型反式茴香脑加氧酶氨基酸序列相比，其185位氨基酸Glu变为Asp，所述反式茴香脑加氧酶的突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO 1所示。合成对茴香醛、藜芦醛、洋茉莉醛、香兰素的转化速率分别为原始菌株的1.91、2.08、1.33、1.92倍，5F4在生物法合成芳香醛香料中，展现了良好的应用潜力，同时5F4的催化时pH的适应性更广泛，更适合用工业生产应用，能够降低成本，提高生产效率。
📄 2018106632215
📂 C12N9_02
👤 江南大学
📅 2018-06-25
本发明公开了一种腈水解酶突变体、工程菌及其在合成(R)‑3‑氰基己酸中的应用，所述腈水解酶突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的第135位、第199位、第59位进行单突变或多突变获得的。本发明通过定向进化技术提升腈水解酶活性及立体选择性构建了腈水解酶突变体，与亲本腈水解酶PgNITmut相比，突变体PgNITmut/F135L对底物3‑氰基己腈的对映体选择率(E值)由332提升至419；突变体PgNITmut/F135L/R199W活力提升1.36倍，E值提升至461；突变体PgNITmut/F135L/R199W/T59D活力提升2.05倍，E值提升至569。本发明腈水解酶突变体具有较高的活性及立体选择性，利用高效腈水解酶法合成布瓦西坦手性中间体(R)‑3‑氰基己酸，大幅度降低工业化生产成本，在布瓦西坦工业化生产中具有良好的应用前景。
📄 2023102021266
📂 C12N9_78
👤 浙江工业大学
📅 2023-02-23
本发明涉及一种α-转氨酶突变体及其在不对称合成L-草铵膦中的应用。所述突变体是将SEQ ID:1所示的氨基酸序列的第52、71、81、153、168、324、341和361位中的一个或者多个进行单位点突变或多位点突变获得的。本发明实现高转化率α-转氨酶突变体基因的高效表达，酶活最高为808.1U/mg。本发明中所述α-转氨酶突变体的最适反应温度最高达到67℃，在该温度下催化600mM草铵膦前体酮不对称合成L-草铵膦中，转化率高达100％，是文献报道的最高水平。该CkTA突变体解决了现有α-TA酶活低、底物耐受性差、转化率低的技术难题，具有较好应用前景。
📄 2019100321715
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2019-01-14
本发明涉及一种草铵膦脱氢酶突变体及其编码基因，以及利用该突变体构建的基因工程菌菌及其在催化PPO制备L‑草铵膦中的应用。所述突变体氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，编码基因如SEQ ID No.2所示。本发明构建的基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pETDuet‑1‑PPTGDHE3(A164G‑V354A‑R205K)‑GDH，具有高产草铵膦脱氢酶的性质，用于发酵罐生产，最高酶活力可达6605U/L，可用于微生物催化PPO制备L‑草铵膦，大大节约了成本，具有十分重要的产业价值和显著的社会效益；含草铵膦脱氢酶的固定化全细胞用于催化PPO生产L‑草铵膦，重复使用20次后，固定化细胞仍能保持100％的转化率，具有良好的工业化应用前景。
📄 2021110220135
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2021-09-01
本发明筛选得到一种耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体，增强了突变酶的半衰期，提高了酶对合成D‑阿洛酮糖所用底物D‑果糖的底物亲和力和转化效率，突变体酶A13S在50℃时的t1/2值300min，Tm值由野生酶的55.1℃分别上升为60.8℃，突变体酶最适温度上升为80℃，与野生酶相比提高了20℃；本发明通过突变改善野生酶高温下半衰期过短问题，突变酶相对作用时间长，扩展了相对稀少的酶库，展示了D‑果糖在合成D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶绿色环保、毒性低，副产物少的技术优势，克服了化学合成法易产生三废问题，具有重要的工业应用前景。
📄 2022117047654
📂 C12N9_90
👤 浙江工业大学
📅 2022-12-29
本发明公开了一种栖热腔菌磷酸酶突变体及其应用，所述栖热腔菌磷酸酶突变体由来源于氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的野生型磷酸酶经突变所得，所述突变为以下一种：N212G或N212D。本发明栖热腔菌磷酸酶突变体对氨基葡萄糖‑6‑磷酸具有较高的催化活力(最高达1.64U/mg)，相对于其他磷酸单糖(葡萄糖‑6‑磷酸，葡萄糖‑1‑磷酸，果糖‑6‑磷酸)的酶活力提升不显著或者下降，从而其对氨基葡萄糖‑6‑磷酸的底物专一性较其亲本磷酸酶有了较大的提升。
📄 2021101004298
📂 C12N9_16
👤 浙江工业大学
📅 2021-01-25
本发明公开了双辅酶依赖型草铵膦脱氢酶突变体及其在催化合成L-草铵膦中的应用，该双辅酶依赖型草铵膦脱氢酶突变体，其特征在于，所述突变体由SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的第91位、第111位、第240位和第261位进行多点突变后获得。本发明不仅改变了草铵膦脱氢酶突变体的辅酶依赖性，由原来NADPH依赖性改为NADH/NADPH双依赖性，而且也对草铵膦脱氢酶催化活性进行了改造，活力有了较大提升，并将突变体进一步组合，获得了高活力菌株，催化制备的L-草铵膦转化率高、收率高、产物易于分离提纯且显著缩短了反应进程。
📄 202010644394X
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2020-07-07
本发明公开了一种普鲁兰酶突变体、工程菌及其应用，所述普鲁兰酶突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第365位、第401位、第504位或第499位氨基酸进行单突变或多突变获得的。本发明构建的普鲁兰酶突变体的催化活性、热稳定性与耐酸稳定性均得到了提高，其中突变体PulAR‑A365V‑401C‑H499A‑T504V的催化效率较野生型普鲁兰酶PulAR在pH5.0、6.0，60℃条件下分别提高了6.6倍与9.6倍；在60℃，65℃的半衰期分别比野生型普鲁兰酶提高了2.6和3.1倍，且在pH 4.5与pH 5.0的半衰期分别比野生型普鲁兰酶提高了1.6和1.8倍。
📄 2022102726722
📂 C12N9_44
👤 浙江工业大学
📅 2022-03-18
本发明涉及生物技术领域，公开了一种蔗糖异构酶突变体及其在制备异麦芽酮糖中的应用。本发明通过对来源于Serratia symbiotica的蔗糖异构酶的氨基酸序列进行第149位、第222位、第297位的单点或上述任意多点组合突变，使得得到的蔗糖异构酶突变体用于催化蔗糖制备异麦芽酮糖的催化效率得到提高，具体体现为异麦芽酮糖选择性提升及酶活的提升。在异构化蔗糖生成异麦芽酮糖时，上述突变体对产物异麦芽酮糖的选择性明显提高。同时，上述蔗糖异构酶突变体催化活力也有所提高，因此，上述蔗糖异构酶突变体催化制备异麦芽酮糖效率高，反应时间短。
📄 2025101090376
📂 C12N9_90
👤 浙江工业大学
📅 2025-01-23
本发明公开了一种O‑琥珀酰‑L‑高丝氨酸巯基转移酶突变体及其应用，所述突变体是将SEQ ID NO.1所示的O‑琥珀酰‑L‑高丝氨酸巯基转移酶氨基酸序列的第59位、第119位进行单突变或多突变获得的。本发明通过半理性设计，定点突变技术改造MetZ，最终获得了在不损失酶活力的情况下对高浓度甲硫醇钠环境下耐受性提高的突变体。本发明的突变体对甲硫醇钠的耐受性大幅提高，由突变前的5％提高到15％，具有很大工业价值。本发明突变体对底物的转化率显著提高，有利于生产应用。
📄 2024110578276
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2024-08-02
本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种高催化活性的多聚磷酸激酶突变体及其在合成谷胱甘肽中的应用。本发明提供了一种高催化活性的多聚磷酸激酶突变体，其特征在于：所述多聚磷酸激酶突变体是将SEQ ID NO:2所示氨基酸序列突变为下列之一：（1）将SEQ ID NO:2所示氨基酸序列第234位进行单突变；（2）将SEQ ID NO:2所示氨基酸序列第234位和第166位进行双突变；其中，编码所述SEQ ID NO:2所示氨基酸序列编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1。本发明提供的单位点突变多聚磷酸激酶突变体chPPK‑N234A以及双位点突变多聚磷酸激酶突变体chPPK‑N234A/K166D具有高活性，相较于野生型多聚磷酸激酶酶活分别提高了4.19倍和6.12倍。
📄 2024113519176
📂 C12N9_12
👤 浙江工业大学
📅 2024-09-26
本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其应用，所述ω‑转氨酶突变体是将SEQ ID NO.1所示野生型ω‑转氨酶氨基酸序列的第54位色氨酸、第411位精氨酸经单点或多点突变所得。相比野生型ω‑转氨酶，本发明的ω‑转氨酶突变体催化前手性酮生成手性胺的催化效率高，其中突变体R411A催化4‑(三氟甲基)苯乙酮的转化产率为野生型ω‑转氨酶的2.39倍，所得产物对映体过量值(enantiomeric excess,ee)>99.9％。
📄 2022116105949
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2022-12-14
柿子坊 · 知识产权运营
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