本申请公开了一种可降解果聚糖的外切左聚糖酶及其编码基因。该外切左聚糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该左聚糖酶的编码基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所述的外切左聚糖酶可以水解左聚糖、菊粉,其最终产物为果糖,在高果糖浆生产等果糖基资源利用领域具有良好的应用潜力。
📄 2022115479422
📂 C12N9_24
👤 江苏海洋大学
📅 2022-12-05
本发明属于药物合成技术领域,尤其涉及一种黄嘌呤生物碱9-N-甲基转移酶和苦茶生物碱theacrine的制备方法。本发明提供了一种重组蛋白,实验结果表明,本发明重组蛋白具有黄嘌呤生物碱9-N-甲基转移酶活性,能够以1,3,7-三甲基尿酸为底物,作为黄嘌呤生物碱9-N-甲基转移酶对1,3,7-三甲基尿酸进行9-N-甲基化酶促反应,生物合成得到theacrine,并且,氨基酸序列如SEQ ID No:3所示的重组蛋白作为黄嘌呤生物碱9-N-甲基转移酶的活性非常高。
📄 2020100718262
📂 C12N9_10
👤 暨南大学
📅 2020-01-21
本发明提供一种褐藻胶裂解酶的培养方法,包括种子的活化、发酵和纯化。该褐藻胶裂解酶的培养方法,采用的种子培养基和发酵培养基营养均衡全面、营养功效成分多重交叉,更有利于微生物的生长,提高了褐藻胶裂解酶的产率和活性,从而降低成本,提高了经济效益。
📄 2019106082351
📂 C12N9_88
👤 山东德图农业科技有限公司
📅 2019-07-08
本发明公开了一种改变脂肪酶催化活性的活性重塑方法,属于酶工程技术领域。本发明通过脂肪酶体外重塑过程中添加不同的调节因子,获得具有高酯化活性的重构脂肪酶,以满足脂肪酶非水相催化的需要。将不具有酯化活性或者活性较低的各种微生物脂肪酶,包括大肠杆菌工程菌外源表达的脂肪酶以及商品脂肪酶,经8M尿素变性处理,在复性过程中添加从华根霉细胞提取的膜环境复合物WTS,可获得酯化活性显著提高的活性重塑脂肪酶,同时脂肪酶常见的水解活性也发生变化。酯化活性的恢复使脂肪酶更适合工业化应用。
📄 2016102619532
📂 C12N9_20
👤 江南大学
📅 2016-04-25
本发明公开了一种反式茴香脑加氧酶的突变体和突变株,所述反式茴香脑加氧酶的突变体与野生型反式茴香脑加氧酶氨基酸序列相比,其185位氨基酸Glu变为Asp,所述反式茴香脑加氧酶的突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO 1所示。合成对茴香醛、藜芦醛、洋茉莉醛、香兰素的转化速率分别为原始菌株的1.91、2.08、1.33、1.92倍,5F4在生物法合成芳香醛香料中,展现了良好的应用潜力,同时5F4的催化时pH的适应性更广泛,更适合用工业生产应用,能够降低成本,提高生产效率。
📄 2018106632215
📂 C12N9_02
👤 江南大学
📅 2018-06-25
本发明公开了一种腈水解酶突变体、工程菌及其在合成(R)‑3‑氰基己酸中的应用,所述腈水解酶突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的第135位、第199位、第59位进行单突变或多突变获得的。本发明通过定向进化技术提升腈水解酶活性及立体选择性构建了腈水解酶突变体,与亲本腈水解酶PgNITmut相比,突变体PgNITmut/F135L对底物3‑氰基己腈的对映体选择率(E值)由332提升至419;突变体PgNITmut/F135L/R199W活力提升1.36倍,E值提升至461;突变体PgNITmut/F135L/R199W/T59D活力提升2.05倍,E值提升至569。本发明腈水解酶突变体具有较高的活性及立体选择性,利用高效腈水解酶法合成布瓦西坦手性中间体(R)‑3‑氰基己酸,大幅度降低工业化生产成本,在布瓦西坦工业化生产中具有良好的应用前景。
📄 2023102021266
📂 C12N9_78
👤 浙江工业大学
📅 2023-02-23
本发明涉及一种α-转氨酶突变体及其在不对称合成L-草铵膦中的应用。所述突变体是将SEQ ID:1所示的氨基酸序列的第52、71、81、153、168、324、341和361位中的一个或者多个进行单位点突变或多位点突变获得的。本发明实现高转化率α-转氨酶突变体基因的高效表达,酶活最高为808.1U/mg。本发明中所述α-转氨酶突变体的最适反应温度最高达到67℃,在该温度下催化600mM草铵膦前体酮不对称合成L-草铵膦中,转化率高达100%,是文献报道的最高水平。该CkTA突变体解决了现有α-TA酶活低、底物耐受性差、转化率低的技术难题,具有较好应用前景。
📄 2019100321715
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2019-01-14
本发明涉及一种草铵膦脱氢酶突变体及其编码基因,以及利用该突变体构建的基因工程菌菌及其在催化PPO制备L‑草铵膦中的应用。所述突变体氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,编码基因如SEQ ID No.2所示。本发明构建的基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pETDuet‑1‑PPTGDHE3(A164G‑V354A‑R205K)‑GDH,具有高产草铵膦脱氢酶的性质,用于发酵罐生产,最高酶活力可达6605U/L,可用于微生物催化PPO制备L‑草铵膦,大大节约了成本,具有十分重要的产业价值和显著的社会效益;含草铵膦脱氢酶的固定化全细胞用于催化PPO生产L‑草铵膦,重复使用20次后,固定化细胞仍能保持100%的转化率,具有良好的工业化应用前景。
📄 2021110220135
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2021-09-01
本发明筛选得到一种耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体,增强了突变酶的半衰期,提高了酶对合成D‑阿洛酮糖所用底物D‑果糖的底物亲和力和转化效率,突变体酶A13S在50℃时的t1/2值300min,Tm值由野生酶的55.1℃分别上升为60.8℃,突变体酶最适温度上升为80℃,与野生酶相比提高了20℃;本发明通过突变改善野生酶高温下半衰期过短问题,突变酶相对作用时间长,扩展了相对稀少的酶库,展示了D‑果糖在合成D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶绿色环保、毒性低,副产物少的技术优势,克服了化学合成法易产生三废问题,具有重要的工业应用前景。
📄 2022117047654
📂 C12N9_90
👤 浙江工业大学
📅 2022-12-29
本发明公开了一种栖热腔菌磷酸酶突变体及其应用,所述栖热腔菌磷酸酶突变体由来源于氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的野生型磷酸酶经突变所得,所述突变为以下一种:N212G或N212D。本发明栖热腔菌磷酸酶突变体对氨基葡萄糖‑6‑磷酸具有较高的催化活力(最高达1.64U/mg),相对于其他磷酸单糖(葡萄糖‑6‑磷酸,葡萄糖‑1‑磷酸,果糖‑6‑磷酸)的酶活力提升不显著或者下降,从而其对氨基葡萄糖‑6‑磷酸的底物专一性较其亲本磷酸酶有了较大的提升。
📄 2021101004298
📂 C12N9_16
👤 浙江工业大学
📅 2021-01-25
本发明公开了双辅酶依赖型草铵膦脱氢酶突变体及其在催化合成L-草铵膦中的应用,该双辅酶依赖型草铵膦脱氢酶突变体,其特征在于,所述突变体由SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的第91位、第111位、第240位和第261位进行多点突变后获得。本发明不仅改变了草铵膦脱氢酶突变体的辅酶依赖性,由原来NADPH依赖性改为NADH/NADPH双依赖性,而且也对草铵膦脱氢酶催化活性进行了改造,活力有了较大提升,并将突变体进一步组合,获得了高活力菌株,催化制备的L-草铵膦转化率高、收率高、产物易于分离提纯且显著缩短了反应进程。
📄 202010644394X
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2020-07-07
本发明公开了一种普鲁兰酶突变体、工程菌及其应用,所述普鲁兰酶突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第365位、第401位、第504位或第499位氨基酸进行单突变或多突变获得的。本发明构建的普鲁兰酶突变体的催化活性、热稳定性与耐酸稳定性均得到了提高,其中突变体PulAR‑A365V‑401C‑H499A‑T504V的催化效率较野生型普鲁兰酶PulAR在pH5.0、6.0,60℃条件下分别提高了6.6倍与9.6倍;在60℃,65℃的半衰期分别比野生型普鲁兰酶提高了2.6和3.1倍,且在pH 4.5与pH 5.0的半衰期分别比野生型普鲁兰酶提高了1.6和1.8倍。
📄 2022102726722
📂 C12N9_44
👤 浙江工业大学
📅 2022-03-18