本发明公开了一种腈水解酶突变体及其在制备抗癫痫药物中间体中的应用,所述突变体是将SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第151位,第223位和第250位氨基酸中的一位或多位进行突变获得的。本发明腈水解酶突变体AcN‑T151V/C223A/C250G的热稳定性提高了1.73倍,且利用含有腈水解酶突变体的重组大肠杆菌在35℃下水解1M 1‑氰基环己基乙腈生成1‑氰基环己基乙酸,最终产物得率达95%。在35℃下水解1.2M 1‑氰基环己基乙腈时,最终产率达97%。使用本发明腈水解酶突变体合成加巴喷丁,最终产率达80%。