本发明涉及一种c‑KIT体细胞突变基因检测试剂盒及其检测方法,该试剂盒包括用于检测c‑KIT体细胞基因突变引物和探针,具体为用于检测c‑KIT基因11号外显子的引物和探针,引物序列如SEQ ID NO:1‑6所示,探针序列如SEQ ID NO:7‑8所示;用于检测c‑KIT基因9号外显子的引物和探针,引物序列如SEQ ID NO:9‑10所示,探针序列如SEQ ID NO:11所示;用于检测c‑KIT基因13号外显子的引物和探针,引物序列如SEQ ID NO:12‑14所示,探针序列如SEQ ID NO:15所示;用于检测c‑KIT基因17号外显子的引物和探针,引物序列如SEQ ID NO:16‑19所示,探针序列如SEQ ID NO:20所示。本发明的检测试剂盒及检测方法检测位点数远比同类产品多、位点齐全、检测灵敏度高、特异性强、准确度高,成本低,可满足临床GIST靶向用药c‑KIT突变检测。