本发明涉及生物技术领域，公开了一种羰基还原酶突变体及其在酶法合成手性醇中的应用。本发明通过将如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列进行第36位赖氨酸突变为天冬氨酸、苏氨酸、缬氨酸中的任意一种或/和第125位组氨酸突变为赖氨酸、丝氨酸、亮氨酸中的任意一种，或和第170位组氨酸突变为赖氨酸、半胱氨酸、亮氨酸中的任意一种的突变，使得到相较于野生型的活性具有不同程度的提升的羰基还原酶突变体，尤其是单点突变体Mut‑T75K、Mut‑T75D、Mut‑E216M以及组合突变体Mut‑T75K‑E216M，具有优异的相对酶活、热稳定性及对底物的耐受性，且针对多种手性醇都具有较高的活性与稳定性，具有催化活性高、热稳定性高、底物耐受性强、易于发酵等优点。
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