本发明涉及生物工程技术领域,具体涉及一种高催化活性的多聚磷酸激酶突变体及其在合成谷胱甘肽中的应用。本发明提供了一种高催化活性的多聚磷酸激酶突变体,其特征在于:所述多聚磷酸激酶突变体是将SEQ ID NO:2所示氨基酸序列突变为下列之一:(1)将SEQ ID NO:2所示氨基酸序列第234位进行单突变;(2)将SEQ ID NO:2所示氨基酸序列第234位和第166位进行双突变;其中,编码所述SEQ ID NO:2所示氨基酸序列编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1。本发明提供的单位点突变多聚磷酸激酶突变体chPPK‑N234A以及双位点突变多聚磷酸激酶突变体chPPK‑N234A/K166D具有高活性,相较于野生型多聚磷酸激酶酶活分别提高了4.19倍和6.12倍。