本发明公开了一种腈水解酶突变体及其在制备1-氰基环己基乙酸中的应用，所述突变体是将SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第180位，第205位氨基酸中的一位或多位进行突变获得的。本发明经过半理性设计，对蛋白质进行分子改造，腈水解酶双突变体AcN-G180D/A205C的比酶活最高提高了1.6倍，转化率>99％，且利用含有腈水解酶突变体的重组大肠杆菌在高温下(50℃)水解1-氰基环己基乙腈，反应时间缩短为原来的四分之一。因此，本发明所获得的突变体在高效催化1-氰基环己基乙腈合成加巴喷丁中间体1-氰基环己基乙酸中具有良好的应用前景。
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