摘要
本发明公开了一种十字花科植物腈水解酶突变体,属于生物工程技术领域。本发明将高山南芥腈水解酶氨基酸序列的225-285位肽段嵌入到缺失对应肽段的芜菁腈水解酶中,获得芜菁/高山南芥腈水解酶嵌合体,进而对嵌合体BaNIT的编码基因进行定点饱和突变,获得植物腈水解酶突变体,所述的植物腈水解酶突变体为下列之一或其中两种以上:(1)第223位的L突变为Q;(2)第263位的H突变为D;(3)第279位的Q突变为E。本发明提供的植物腈水解酶突变体的催化活力提高2.23倍,重组蛋白的可溶性大幅提高,对映体选择率E值保持在400以上,在高效催化外消旋异丁基丁二腈合成(S)-3-氰基-5-甲基己酸中具有良好的应用前景。