发明专利 已授权

一种双荧光筛选β-丙氨酸合成酶的方法

📄 申请号:CN201910071013.0 📄 发布日:2026/08/04

著录项目信息

申请日
2019-01-25
公开号
CN109880885B
公开日
2022-06-21
申请人
浙江工业大学
法律状态
已下证
专利类型
发明
主分类号
IPC 分类号

技术画像

应用场景

生物医药, 合成生物学, 生物催化, 工业酶制剂, 药物筛选

摘要

本发明公开了一种双荧光法筛选β‑丙氨酸合成酶的方法,将荧光报告基因与β‑丙氨酸合成酶基因共同导入宿主菌中,接种含阿拉伯糖的基本盐培养基,在30~37℃诱导培养后,获得发酵液;取发酵液冻融破胞,取破胞液即为粗酶液;取粗酶液加入L‑天冬氨酸,于37℃条件下静置2h进行转化反应将底物转化为β‑丙氨酸,取转化液在吸收波长355nm和发射波长445nm的条件下测定荧光值;取发酵液在吸收波长395nm和发射波长509nm的条件下测定荧光值,筛选获得高活力β‑丙氨酸合成酶;本发明体系操作简便、酶活测量稳定、酶活检测灵敏度高等优点,在β‑丙氨酸合成酶定向改造方面具重要的应用价值。

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图2
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