摘要
一种甾体C14α羟化酶的可溶性表达载体及其构建方法和应用,属于生物技术技术领域。本发明将编码甾体C14α羟化酶的核酸序列和编码可溶性标签麦芽糖结合蛋白的核酸序列在载体中表达,所述编码甾体C14α羟化酶的核酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述甾体C14α羟化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明建立了真菌来源的酶在大肠杆菌中的可溶性表达载体以及方法,为其他CYP酶在大肠杆菌中异源表达时获得可溶性的成分提供了一种新思路。本发明通过构建分子内递氢系统,显著提升了羟基化过程的电子传递效率,部分解决了P450单加氧酶催化反应中电子传递效率较低导致的整体催化速率较低的问题。