本发明公开了一种与小麦旗叶宽度主效QTL紧密连锁的分子标记及应用。本发明还公开了一种用于鉴定或辅助鉴定小麦旗叶宽度性状的引物对,为能够扩增得到如下DNA片段的引物对:所述DNA片段是以小麦基因组DNA为模板,采用如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示5BID-4引物对进行PCR扩增所得的DNA片段。本发明所提供的小麦旗叶宽主效QTL的分子标记可用于检测小麦品种或品系中是否含有增加小麦旗叶宽的QTL,以便快速筛选出具有增加小麦旗叶宽的QTL的小麦品种或品系用于育种,可大大加快小麦优异品种的选育进程,为小麦产量性状分子育种提供优异基因资源和选择工具。