摘要
本发明属于生物医药分析技术领域,具体公开了一种快速检测循环肿瘤DNA基因突变的方法、系统及其应用。本发明以BRAF V600E基因序列作为体外生物标志物,建立了基于三维DNA步行器和CRISPR/Cas12a的荧光检测策略。所述方法包括:采用三维DNA步行器识别和结合靶DNA,在核酸内切酶驱动下循环剪切轨道链S,产生的输出链OD与crRNA特异性结合,并激活Cas12a的非特异性反式裂解活性,从而切割信号报告分子,产生荧光信号进行检测。本发明提供了一个快速、灵敏、特异性好的ctDNA检测平台,在早期临床诊断和生物医学研究方面具有良好的潜力。