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一种通过CRISPR/Cas9系统快速获得大片段缺失的细胞系基因敲除方法

Name: 一种通过CRISPR/Cas9系统快速获得大片段缺失的细胞系基因敲除方法
Brand: 新乡医学院
SKU: 2017106334673
Availability: InStock

📄 申请号：CN201710633467.3 📄 发布日：2026/11/10

著录项目信息

申请日

2017-07-28

公开号

CN107435051B

公开日

2020-06-02

申请人

新乡医学院

法律状态

已下证

专利类型

发明

主分类号

C12N15_85

IPC 分类号

C12N15_85 , C12N15_65 , C12N15_90 ,

技术画像

所属领域

基因编辑基因编辑 CRISPR/Cas9 细胞系构建

应用场景

生物医药, 药物筛选, 功能基因组研究, 细胞模型构建, 基因治疗研究

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摘要

本发明涉及一种通过CRISPR/Cas9系统快速获得大片段缺失的细胞系基因敲除方法，属于基因工程和遗传修饰领域。本发明改造pX458载体，使其带有DsRed2和ECFP，然后针对目标基因设计多个特异性的sgRNA位点，将其连接至改造载体中，转染细胞系后利用流式细胞仪对细胞群进行分选，可以非常快速获得基因组被编辑的单细胞，然后用PCR扩增单细胞DNA序列，通过凝胶电泳即可以从中挑选出具有大片段缺失的单细胞。本发明通过将CRISPR/Cas9系统、流式细胞仪单细胞分选和表达载体上的荧光蛋白筛选三者结合起来，可以在短时间内获得具有大片段缺失的阳性单克隆，极大地提高细胞系基因敲除工作效率。

常见问题

这项专利是否已经下证？

是的，该专利已下证，法律状态为“已下证”，公开号： CN107435051B

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权利要求书 (12项) 说明书附图

……

图1

图2

图3

法律状态时间线

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当前第 / 件

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议价

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📋 交易方式： 委托待转让 📌 交易状态：在售 👁️ 浏览次数：3 ❤️ 收藏人数：93 📋 项目申报： 未申报

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🏢 淄博智来知识产权服务有限公司

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