一种新金色分枝杆菌工程菌的基因编辑方法及系统，属于基因工程技术领域。本发明公开的编辑系统包括pMV261‑rAPOBEC/n(d)Cas9/UGI质粒和pTarget‑sgRNA质粒，pMV261‑rAPOBEC/n(d)Cas9/UGI质粒可以融合表达丧失切割活性的Cas9蛋白、胞嘧啶脱氨酶和尿嘧啶糖苷酶抑制剂，在sgRNA的引导下可在靶向目的基因，对序列N20片段中的胞嘧啶(C)进行脱氨反应，转变为尿嘧啶(U)，并在后续复制过程中变为胸腺嘧啶(T)形成TAG，TGA和TAA终止密码子，达到沉默或中断目的基因正常反应的目的。该系统对宿主的毒性低，可特异性编辑，且稳定传代，编辑效率最高可以达到50％。
📄 2021113251563
📂 C12N15_74
👤 浙江工业大学
📅 2021-11-10
本发明公开了编辑ptoESK1基因在提高杨树产糖效率或/和乙醇产量中的应用，本发明利用CRISPR/Cas9技术对毛白杨中PtoESK1进行编辑，获得的转基因植株的细胞壁酶解转化产糖效率和乙醇产量显著提高。本发明为植物的细胞壁遗传改良和定向分子育种奠定了基础，为植物基因工程提供了新的基因资源，具有广泛的应用前景。
📄 2023114976070
📂 C12N15_84
👤 西南大学
📅 2023-11-11
本发明公开了敲低Seroin1基因的家蚕双元转基因系统及家蚕纯裸蛹品种的制备方法，通过CRISPR/Cas9系统介导Seroin1基因敲除表达，获得seroin1基因功能缺陷的家蚕品系，由于丧失吐丝结茧能力，致使蚕变为裸蛹，幼虫生长周期变短，缩短了饲养时间，减少了桑叶、饲料等的消耗，蛹体变大，蛹重大幅度增加，从源头上解决了食用蚕蛹削茧所带来的的人力物力的消耗问题，可以提高生产效益，具有重要的应用价值。
📄 2020109411048
📂 C12N15_113
👤 西南大学
📅 2020-09-09
本发明公开了Cas9介导的家蚕基因编辑载体，包括组成型基因编辑载体和诱导型基因编辑载体，其中组成型基因编辑载体包括U6启动子调控sgRNA表达的表达框U6‑sgRNA和IE‑1启动子调控Cas9表达的表达框，诱导型基因编辑载体Cas9由Hr3‑39k诱导型启动子调控表达，本发明的Cas9介导的基因编辑载体能够稳定、高效编辑目的基因，为制备昆虫抗病毒转基因素材和具有高效抗病毒的品种提供了有力的工具。
📄 2015106309390
📂 C12N15_85
👤 西南大学
📅 2015-09-29
本发明公开了一种适用于沙雷氏菌基因改造的CRISPR‑Cas9双载体系统，包括：载体pCAS‑p15A‑sacBΔλ‑Red和载体pTarget F‑Gm。本发明弥补沙雷氏菌基因编辑系统方面的局限性，为沙雷氏菌基因功能的验证和沙雷氏菌株次级代谢产物产生机制的研究提供了平台。利用本发明构建的CRISPR‑Cas9双载体系统进行基因luxS的敲除与回补实验，对沙雷氏菌YD25次级代谢产物灵菌红素和Serrawettin W2的共调控机制进行了初步研究。确定了基因luxS对灵菌红素和Serrawettin W2合成的正调控作用。
📄 2020102666224
📂 C12N15_74
👤 陕西师范大学
📅 2020-04-07
本发明涉及基因工程技术领域，具体公开了一种基于CRISPR/Cas9技术获取Period基因突变位点的方法及用途，通过sgRNA模板的合成和体外转录，每粒卵显微注射sgRNA/Cas9蛋白，显微注射后G0代突变检测突变的发生情况。本发明的方法成功发现了2个可用于敲除Period基因的靶标位点，对于Period在斜纹夜蛾体内的功能分析奠定了基础。
📄 2021108869000
📂 C12N15_113
👤 淮北师范大学
📅 2021-08-03
本发明公开了一种CRISPR‑Cas12a基因编辑系统及应用，涉及基因工程技术领域。所述CRISPR‑Cas12a基因编辑系统包括1307‑2hyg‑LbCas12a‑crRNA质粒。本发明可以对灰葡萄孢进行定点基因编辑。本发明所制备的载体将Cas12a蛋白与crRNA序列构建于同一载体转入灰葡萄孢中，流程进行缩减。
📄 2023113916886
📂 C12N15_113
👤 河北农业大学
📅 2023-10-25
本发明公开了一种用于敲除拟南芥ROS1基因的向导RNA、方法及应用，所述向导RNA包括如SEQ ID No:1和SEQ ID No:2的一对序列。所述方法采用如上述所述的向导RNA。本发明的技术方案能够有效敲除ROS1基因的gRNA序列，并基于此获得不同拟南芥品种的等位突变体，进一步达到鉴定成本低，时间短，且能够针对性获得不同拟南芥品种ROS1基因的相同位点突变体。
📄 2023104497135
📂 C12N15_113
👤 江苏农牧科技职业学院
📅 2023-04-24
本发明公开了一种用于敲除猪RBM20基因部分保守序列的sgRNA组合、猪模型和构建方法，sgRNA组合包括第一sgRNA和第二sgRNA；第一sgRNA的DNA序列的正义链如SEQ ID No:1所示，反义链如SEQ ID No:2所示；第二sgRNA的DNA序列的正义链如SEQ ID No:21所示，反义链如SEQ ID No:22所示。本发明选用具有高打靶效率的sgRNAR6和sgRNAR10实现从PFFs中高效敲除RBM20基因第9外显子，并通过体细胞核移植和胚胎移植技术成功获得RBM20第9外显子敲除猪，为肌肉系统疾病或肌肉损伤、衰老等机制的研究提供了新的动物模型和更多的生物材料选择。
📄 2024112357475
📂 C12N15_113
👤 江苏农牧科技职业学院
📅 2024-09-04
本发明公开了一种小鼠条件性诱导Hmox1基因敲除模型的构建方法及应用，属于生物技术领域。本发明提供的小鼠条件性诱导Hmox1基因敲除模型由以下步骤构建：构建同源重组DNA载体；通过体外转录获得Cas9mRNA和针对Hmox1基因的gRNA；将同源重组DNA载体、Cas9mRNA和gRNA注射到小鼠的受精卵中；培育获得条件性基因敲除小鼠；通过测序和核酸胶电泳鉴定基因型；得到的条件性敲除小鼠与其他组织特异性表达Cre的小鼠杂交获得相应组织或细胞条件性敲除小鼠，从而实现特定组织或细胞类型的精准研究；并且证明Hmox1诱导性条件性敲除明显加重急性肺损伤。本发明能够克服现有技术中Hmox1全身基因敲除小鼠胚胎致死，无法构建小鼠模型的困难，辅助Hmox1在疾病中的研究。
📄 2022112968624
📂 C12N15_90
👤 江南大学
📅 2022-10-21
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