摘要
本发明筛选得到一种耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体,增强了突变酶的半衰期,提高了酶对合成D‑阿洛酮糖所用底物D‑果糖的底物亲和力和转化效率,突变体酶A13S在50℃时的t1/2值300min,Tm值由野生酶的55.1℃分别上升为60.8℃,突变体酶最适温度上升为80℃,与野生酶相比提高了20℃;本发明通过突变改善野生酶高温下半衰期过短问题,突变酶相对作用时间长,扩展了相对稀少的酶库,展示了D‑果糖在合成D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶绿色环保、毒性低,副产物少的技术优势,克服了化学合成法易产生三废问题,具有重要的工业应用前景。