摘要
本发明涉及一种高产4‑HBC的分枝杆菌基因工程菌及其构建方法,以及其在微生物发酵制备22‑羟基‑23,24‑双降胆甾‑4‑烯‑3‑酮中的应用。所述高产4‑HBC的分枝杆菌基因工程菌按如下方法构建:以分枝杆菌为底盘菌,依次敲除kshA1、kshA2、kstD1、kstD2、kstD3基因,敲除hsd4A基因,过表达ltp3、ltp4基因,得到所述高产4‑HBC的分枝杆菌基因工程菌。本发明所提供的基因工程菌株可以生产4‑HBC,大大提高甾体药物的生产效率,有助于提高底物的转化率,降低生产成本,且反应条件温和、环境友好,适合于大力推广应用,具有较高的经济效益和社会效益。