摘要
本发明提供基于简化基因组测序技术的褐菖鲉基因筛选和挖掘方法,属于分子标记开发技术领域,包括基因组DNA提取;基因组DNA双酶切;连接反应;PCR扩增;回收序列片段和高通量测序;数据分析筛选和挖掘基因位点。该方法提取的DNA质量较高、酶切割速率得到有效提高、减轻了引物设计的难度、回收得到的片段大小比较均一、测序量比较大、测序结果更准确;可以避开高重复区域等甲基化程度相对较高的区域,从而收集到序列更为特异的酶切片段,使得后续鉴定的SNPs标记有效性更高;获得的核酸分子有极低的偏好性和高复杂度,以确保测序时用最少测序数据得到最大基因覆盖率。